强极性中药组分的亲水作用色谱保留行为研究

摘要

反相色谱是目前应用最为广泛的一种液相色谱模式，它能分析分离大多数有机化合物，但对于强极性化合物，反相色谱并不能提供很好的分离。与反相色谱不同，亲水色谱使用极性固定相、水/有机溶剂作为流动相，能对强极性化合物提供很好的分离，已广泛应用于糖类、氨基酸、多肽、蛋白质、核苷、药物等的分析分离。本文采用二醇基、氨基、δ-葡萄糖酸内酯三种键合固定相，通过改变流动相中有机溶剂、盐和有机酸的种类及其浓度、柱温等条件，系统研究了强极性中药组分在亲水作用色谱中的保留行为，期望为中药有效成分的分离提取奠定基础。具体工作如下：
　　 ⑴通过改变流动相中乙腈、甲醇和四氢呋喃的浓度，研究了有机溶剂种类及其浓度对溶质保留行为的影响。一般地，流动相中水比例在0-100％(v/v)变化时，溶质的保留随水浓度变化呈“U”型曲线，证明所用溶质的保留属于亲水色谱和反相色谱的混合保留机理，而“U”型曲线形状与有机溶剂、固定相性质和溶质分子结构有关。在同一固定相上，采用乙腈时，溶质的保留最强。
　　 ⑵流动相水相中缓冲盐分别选择甲酸铵、甲酸钠、乙酸钠、乙酸铵，通过改变盐浓度研究了溶质在三种固定相上的保留行为。在二醇硅胶中，溶质保留均随盐浓度增加而增强，而在氨丙基硅胶和δ-葡萄糖酸内酯键合硅胶中，酸性溶质保留随盐浓度增加而减弱，分析了产生该现象的原因。还发现，盐种类对溶质保留的影响不符合Hofmeister效应，没有规律可循。
　　 ⑶研究了流动相中添加的乙酸、甲酸、三氟乙酸对溶质在固定相上保留行为的影响。结果发现，在二醇、氨丙基和δ-葡萄糖酸内酯键合固定相上，外加酸对中性溶质保留影响较小，而对酸性溶质保留影响较大。提出在中药组分的分析中，流动相中乙酸、甲酸添加量应控制在0-0.5％，三氟乙酸应控制在0-0.1％为宜。
　　 ⑷在10～50℃范围内研究了柱温对溶质保留的影响。随着温度的升高，在二醇硅胶中，溶质保留均降低；而在氨丙基硅胶和δ-葡萄糖酸内酯键合硅胶中，各个溶质表现出不同的变化趋势。用Van't Hoff作图法，分析了溶质在三种固定相上的驱动力。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章 绪论

1.1引言

1.2亲水作用色谱中的保留机理

1.3亲水作用色谱中的固定相

1.3.1纯硅胶固定相

1.3.2二醇基键合相

1.3.3腈基键合相

1.3.4环糊精键合相

1.3.5氨基键合相

1.3.6酰胺基键合相

1.3.7聚琥珀酰亚胺键合相及它的衍生物

1.3.8两性离子固定相

1.3.9专门用于亲水色谱的固定相

1.4应用

1.4.1小分子化合物

1.4.2农业和食品化学

1.4.3毒素

1.4.4聚合物合成

1.4.5糖类

1.4.6氨基酸和多肽

1.4.7蛋白质组学——二维液相色谱

1.5本研究所选中药组分的性质

1.6本文的研究目的和内容

参考文献

第二章 强极性中药组分的亲水作用色谱保留行为研究

2.1引言

2.2实验

2.2.1仪器

2.2.2试剂

2.2.3固定相的制备

2.2.4色谱柱的装填

2.2.5色谱条件

2.2.6实验方法

2.3结果与讨论

2.3.1有机溶剂对溶质保留和选择性的影响

2.3.2盐种类及其浓度对溶质保留的影响

2.3.3有机酸对溶质保留的影响

2.3.4柱温对溶质保留的影响

2.4 结论

参考文献

攻读硕士学位期间取得的学术成果

致谢