中枢神经系统多潜能神经干细胞体外培养模型的建立及其细胞学特性的初步研究和体内移植实验

摘要

该研究运用细胞培养技术从哺乳动物小鼠体内成功分离具有多种分化潜能的神经干细 胞并建立了体外培养模型,运用免疫细胞化学的方法证明多潜能神经干细胞具有分化出神经系统各类细胞的能力.运用核型分析的方法,证明培养的神经干细胞以体外即使经长期传代后,染色体型核型仍能保持正常,但染色体的分布呈星芒状.不同部位来源的神经干细胞在培养时可表现出不同的生长特性,皮层的神经干细胞形成克隆快,但贴壁性弱;延脑和脊髓的神经干细胞形成克隆较慢,但贴壁性强.用鼠尾胶制成的三维立体培养胶观察神经干细胞克隆在其中的生长状况.通过将来自皮层和脊髓的神经干细胞在体内进行纹状体和脊髓的移植实验表明,神经干细胞可以纹状体和脊髓存活和迁移,并发生分化,但不同来源的神经干细胞间未观察到明显差异,也未观察到部位特异性的神经干细胞的迁移和分化.

目录

摘要

ABSTRACT

前言

一、研究背景

二、神经干细胞的研究现状

三、参考文献

第一部分神经干细胞培养模型的建立

一、细胞培养

1、材料

2、方法

二、模型鉴定

1、材料

2、方法

3、结果

4、讨论

5、参考文献

第二部分培养神经干细胞有关细胞学特性的研究

一、核型分析

1、材料

2、方法

3、结果

4、讨论

5、参考文献

二、不同部位来源的神经干细胞的生长特性

1、材料

2、方法

3、结果

4、讨论

5、参考文献

三、细胞外基质对神经干细胞生长特性的影响

实验Ⅰ神经干细胞克隆在立体培养基质内的生长特性

实验Ⅱ神经干细胞克隆在不同细胞外基质上的生长特性

四、神经干细胞克隆内细胞的超微结构研究

1、材料和方法

2、结果

3、讨论

4、参考文献

五、神经干细胞在ceramide模拟的应激刺激(STRESSSHOCK)作用下相关的第二信使传导路的变化情况

1、材料

2、方法

3、结果

4、讨论

5、参考文献

六、神经干细胞分化相关基因numb和patched表达的分析

实验Ⅰ神经干细胞内参与非对称性分裂的numb基因的表达

实验Ⅱ神经干细胞内sonic hedgehog受体patched基因的表达

参考文献

第三部分神经干细胞的体内移植

1、材料

2、方法

3、结果

4、讨论

5、参考文献

结论

在读期间发表的论文

致谢