选择性表皮生长因子受体阻断剂Tyrphostin AG1478对肾癌细胞系GRC-1的生物学作用及其意义

摘要

表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor EGFR)在包括肾癌等多种恶性肿瘤中都有过量表达.为明确选择性EGFR阻断剂对肾癌细胞的影响,以了解是否可能把这类药物应用到肾癌的治疗当中,我们将不同浓度的AG1478作用于肾颗粒细胞癌GRC-1细胞株,采用MTT试验,观察细胞增殖能力的变化;应用光学显微镜和电子显微镜观察细胞形态学变化;使用流式细胞仪检测细胞周期的改变;以及应用流式细胞仪和DNA琼脂凝胶电冰的方法检测细胞凋亡.结果显示:AG1478在较低的浓度下即对GRC-1细胞产生抑制作用,呈剂量效应关系(p<0.05)其IC<,50>为6.35μmol/l.经流式细胞仪测定,GRC-1细胞周期主要停滞在G<,1>期,呈剂量-效应关系.用10μmol/lAG1478作用GRC-1细胞72小时,形态学上,细胞数量明显减少,形态变为梭形,覆盖生长现象消失,表面微绒毛消失,胞浆浓缩,线粒体、溶酶体肿胀,染色质边集.流式细胞仪在药物作用早期(24小时)即可检测到细胞凋亡,而DNA电泳在药物作用晚期(96小时)表现为较为典型的梯状图谱(DNAladder).上述结果表明:EGFR对肾癌的生物学行为发挥重要作用;选择性EGFR阻断剂是有效的肾肿瘤抑制剂,具有进一步研究和开发的价值.

目录

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英文缩略词表

文献回顾

一、引言

二、信号转导与受体酪氨酸激酶

三、EGFR作为肿瘤治疗靶点的提出

四、EGFR及其信号转导途径

五、肿瘤细胞TGF—EGFR自分泌环的活化机制

六、针对EGFR的肿瘤治疗策略

七、选择性EGFR-PTK抑制剂

前言

实验部分

材料、试剂与仪器

实验方法

实验结果

讨论

结论

参考文献

致谢