果糖饮食诱发的IETM在MS及其相关疾病发生中的作用:甘氨酸的保护机制

摘要

目的:
　　 探讨肠源性内毒素血症(IETM)在高果糖饮食致大鼠代谢综合征(MS)中发挥的作用，及甘氨酸(glycine)对MS及肠黏膜屏障的保护作用。
　　 方法:
　　 模型组大鼠给予8％的果糖水喂养，干预组给予8％的果糖+1％的甘氨酸水喂养。每月测量大鼠体重及收缩压，分别于2月、4月、6月、8月处死动物，麻醉后腹主动脉取血并分离血浆，迅速分离小肠上段，部分置于l0％中性福尔马林，其余样本-80℃冷冻保存。
　　 1、血脂检测
　　 采用酶法测定血浆甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、总胆固醇(TC)及游离脂肪酸(FFA)水平。
　　 2、检测血浆内毒素、胰岛素、促炎因子及胰岛素抵抗评估
　　 鲎试剂显色法检测血浆内毒素(LPS)水平；采用ELISA试剂盒检测血浆胰岛素、TNF-α及IL-10的变化；采用HOMA-IR评估胰岛素抵抗(IR)指数，计算公式为:空腹血糖(mmol/L)x空腹胰岛素(EU/mL)/22.5。
　　 3、小肠组织病理学检测
　　 小肠组织采用常规石蜡包埋、切片，切片厚度为5μm，H&E染色，镜下观测组织病理学变化；采用改良Gomori法检测肠碱性磷酸酶(AKP)的表达。
　　 结果:
　　 实验期间，大鼠状况良好，模型组大鼠3月～6月体重增加明显（P＜0.05，P＜0.01）,3月后收缩压升高(P＜0.05，P＜0.01)。甘氨酸在4月、6月显著降低模型组体重增长(P＜0.05，P＜0.01),4月～6月降低模型组收缩压的升高(P＜0.05，P＜0.01)。
　　 1、血脂变化
　　 模型组2月后血浆TG、TC及FFA水平明显升高(P＜0.01，P＜0.05)，HDL-C水平显著降低(P＜0.01，P＜0.05)。甘氨酸显著降低模型组各时间点血浆TG水平，显著降低模型组6月、8月血浆FFA水平（P＜0.01,P＜0.05）。
　　 2、血浆LPS、胰岛素、促炎因子及IR变化
　　 模型组大鼠2月后血浆LPS、胰岛素及HOMA-IR显著升高（P＜0.01）,4月、8月血浆TNF-α及IL-6水平显著升高（P＜0.01）。甘氨酸显著降低模型组血浆LPS、血浆胰岛素、HOMA-IR及促炎因子(TNF-α，IL-10)水平(P＜0.05，P＜0.01)。
　　 3、血浆LPS与HOMA-IR及FFA的相关性
　　 血浆LPS水平与HOMA-IR（rs=0.76，P=0.0164）及FFA（rs=0.65，P=0.0001）正相关。
　　 4、组织病理学变化
　　 模型组大鼠小肠粘膜结构破坏，AKP阳性反应明显减弱，且上述损害明显表现为时间依赖性。甘氨酸干预可明显改善模型组小肠组织病理损伤及AKP表达。
　　 结论:
　　 1、高果糖饮食可诱导大鼠发生MS，表现为肥胖、糖耐量异常、IR、异常脂血症、高血压等，这可能与伴有IETM所致的IR(特别是肝IR)密切相关。甘氨酸通过减轻IETM进而改善IR、炎症，对高果糖饮食诱导的MS发挥明显保护作用。
　　 2、高果糖饮食所致模型组大鼠发生MS时伴有IETM，表现为肠壁结构破坏、通透性增加及肠APK表达下降。甘氨酸通过减轻肠壁结构破坏和增加小肠APK表达使高果糖饮食诱导的IETM明显减轻。

目录

声明

英文缩略词对照表

第一部分 甘氨酸对果糖饮食致大鼠发生MS及肠黏膜屏障影响的研究

实验一 IETM在果糖饮食所致大鼠发生MS中的作用及甘氨酸的保护机制

材料与方法

结果

讨论

参考文献

实验二 高果糖饮食对大鼠肠黏膜屏障的影响及甘氨酸的保护作用

材料与方法

结果

讨论

参考文献

小结

第二部分 IETM在果糖饮食所致与MS相关疾病中的作用及甘氨酸的保护机制

实验三 IETM在MS相关的NAFLD发病中的作用及甘氨酸的保护机制

材料与方法

结果

讨论

参考文献

实验四 IETM在MS相关的II型糖尿病中的作用及甘氨酸的保护机制

材料与方法

结果

讨论

参考文献

实验五 IETM对高血压大鼠血管内皮功能的影响及甘氨酸的保护作用

材料与方法

结果

讨论

参考文献

实验六 甘氨酸对高果糖诱导高血压大鼠肾素-血管紧张素系统的影响

材料与方法

结果

参考文献

小结

第三部分 IETM在果糖饮食诱发的早期AD样病变中的作用及甘氨酸的保护机制

实验七 IETM在果糖饮食致大鼠认知功能损害中的作用及甘氨酸的保护机制

材料与方法

结果

讨论

参考文献

实验八 甘氨酸对高果糖饮食大鼠Aβ1-40、脑组织tau蛋白及SP的影响

材料与方法

结果

讨论

参考文献

小结

论文总结

综述

个人简介

致谢