细胞外酸性环境对大鼠冠状动脉静息张力的影响及其与钾通道、p38MAPK的关系

摘要

目的: 1、观察细胞外液酸化对大鼠离体冠状动脉环静息张力的影响。 2、观察电压依赖性钾通道(KV）、ATP敏感性钾通道(KATP)和大电导钙激活钾通道(BKCa)在细胞外液酸化所致大鼠离体冠状动脉环静息张力改变中的作用。 3、观察p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)在细胞外液酸化所致大鼠离体冠状动脉环静息张力改变中的作用。 方法: 1、将雄性大鼠(200～250g)断头处死，立即取出心脏置于4℃的生理盐水溶液(physiologicalsalt solution，PSS)中，在显微镜下迅速分离冠状动脉，剪成2mm长的动脉环，将其固定在离体微动脉张力测定仪的传感器上。采用PowerLab和DMT微血管环张力记录系统，观察细胞外液酸化(pH7.2、7.0、6.8、6.6)对大鼠离体冠状动脉环静息张力的影响。 2、观察KV阻断剂4-氨基吡啶(4-AP)(0.3 mmol/L、1 mmol/L)、KATP阻断剂格列苯脲(Gli)(0.003 mmol/L、0.01 mmol/L、0.03 mmol/L)和BKCa阻断剂四乙胺(TEA)(1mmol/L、3mmol/L)对细胞外液酸化(pH7.2、7.0、6.8、6.6)所致大鼠离体冠状动脉环静息张力改变的影响。 3、观察p38 MAPK抑制剂SB239063(1μmol/L)对细胞外液酸化(pH7.2、7.0、6.8、6.6)所致大鼠离体冠状动脉环静息张力改变的影响。 结果: 1、在静息状态下，随细胞外液pH值降低(pH7.2、7.0、6.8、6.6)，大鼠离体冠状动脉环张力逐渐增高。以KCl(60 mmol/L)所致的最大收缩幅度为100％，pH7.2、7.0、6.8、6.6的收缩百分比分别为(4.51±1.48)％、(38.84±7.24)％、(78.61±4.10)％、(101.79±3.64)％。 2、细胞外液酸化(pH7.2、7.0、6.8、6.6)所致大鼠冠状动脉环的收缩百分比分别为(6.57±2.35)％、(34.42±9.48)％、(76.41±8.58)％、(101.91±3.02)％;预孵4-AP(0.3 mmol/L)时，可显著抑制细胞外液pH6.6所致大鼠冠状动脉环的收缩(P＜0.05），其收缩百分比为(85.85±6.61)％;预孵4-AP(1mmol/L)时，可显著抑制细胞外液pH7.0、6.8、6.6所致大鼠冠状动脉环的收缩(P＜0.05)，其收缩百分比分别为(15.39±9.68)％、(42.07±12.81)％、(55.76±15.66)％。且在pH6.6时，4-AP(1 mmol/L)能显著抑制细胞外液酸化所致大鼠冠状动脉环的收缩，与4-AP(0.3 mmol/L)相比，差异有统计学意义(P＜0.05）。 3、细胞外液酸化(pH7.2、7.0、6.8、6.6)所致大鼠冠状动脉环的收缩百分比分别为(6.09±3.20)％、(37.97±11.10)％、(75.73±7.85)％、(102.83±3.64)％;预孵Gli(0.003 mmol/L)时，可显著增强细胞外液pH6.8、6.6所致大鼠冠状动脉环的收缩(P＜0.05)，其收缩百分比分别为(110.12±11.81)％、(124.24±10.14)％;预孵Gli(0.01 mmol/L)时，可显著抑制细胞外液pH6.8、6.6所致大鼠冠状动脉环的收缩(P＜0.05），其收缩百分比分别为(56.19±3.98)％、(59.08±5.52)％;预孵Gli(0.03 mmol/L)时，可显著抑制细胞外液pH6.8、6.6所致大鼠冠状动脉环的收缩(P＜0.05），其收缩百分比分别为(46.19±8.64)％、(29.73±6.12)％。且在pH6.6时，Gli(0.03 mmol/L)能显著抑制细胞外液酸化所致大鼠冠状动脉环的收缩，与Gli(0.01mmol/L)相比，差异有统计学意义（P＜0.05）。 4、细胞外液酸化(pH7.2、7.0、6.8、6.6)所致大鼠冠状动脉环的收缩百分比分别为(8.91±5.57)％、(32.83±7.19)％、(74.01±7.28)％、(102.76±3.94)％;预孵TEA(1 mmol/L)时，可显著增强细胞外液pH7.0、6.8、6.6所致大鼠冠状动脉环的收缩(P＜0.05），其收缩百分比分别为(56.94±14.46)％、(103.22±10.27)％、(119.63±6.55)％;预孵TEA(3 mmol/L)时，可显著增强细胞外液pH7.0、6.8、6.6所致大鼠冠状动脉环的收缩(P＜0.05），其收缩百分比分别为(64.97±11.79)％、(119.32±17.81)％、(134.77±18.20)％。且在pH6.6时，TEA(3 mmol/L)对细胞外液酸化所致大鼠冠状动脉环收缩的增强作用与TEA(1 mmol/L)相比，无统计学差异(P＞0.05)。 5、细胞外液酸化(pH7.2、7.0、6.8、6.6)所致大鼠冠状动脉环的收缩百分比分别为(7.85±3.27)％、(39.04±5.19)％、(78.28±5.39)％、(103.89±3.42)％;预孵SB239063(1μmol/L)时，可显著抑制细胞外液pH7.0、6.8、6.6所致大鼠冠状动脉环的收缩(P＜0.05），其收缩百分比分别为(19.77±4.47)％、(49.21±6.15)％、(62.55±4.63)％。 结论: 1、细胞外液酸化可以引起大鼠冠状动脉收缩。 2、细胞外液酸化所致大鼠冠状动脉的收缩可能与KV、KATP和BKCa的活性有关。 3、细胞外液酸化所致大鼠冠状动脉的收缩可能与p38 MAPK被激活有关。

目录

声明

主要符号表

摘要

前言

1 实验材料

2 实验方法

3 实验结果

4 讨论

结论

参考文献

综述 p38 MAPK的结构及其与心血管疾病的关系

攻读学位期间发表论文情况

致谢

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