巴西蜂胶对高原地区MCI患者外周血炎症因子干预的研究

摘要

目的：探讨巴西蜂胶对青海地区轻度认知障碍（Mild Cognitive Impairment,MCI）患者外周血炎症因子调节及其干预机制。
　　方法：采用随机、双盲、药物对照的试验方法,入组2013年12月来自海拔2,260米西宁地区城镇汉族居民60例MCI患者，随机分为治疗组（口服巴西蜂胶）和对照组（口服安慰剂）各30例，用简易智能状态量表（Mini-Mental State Examination，MMSE）观察治疗前、治疗6月和24月的疗效。采用酶联免疫吸附法（Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测各时段血清中肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α，TNF-α)、转化生长因子-β（Transforming growth factor-β1，TGFβ1）和白介素-1β（Interleukin-1β，IL-1β）、白介素-6（Interleukin-6， IL-6）、白介素-10（Interleukin-10，IL-10）的水平。采用逆转录聚合酶链反应（ Reverse transcription PCR， RT-PCR）检测外周血单核细胞中白介素4（Interleukin-4，IL-4）、IL-6、TGF-β1、干扰素-γ(Interferon-γ，IFN-γ)水平。结果：
　　1.治疗组与对照组比较,两组比较在年龄、性别、民族、文化程度、简易智能状态量表各方面均无显著性差异（P＞0.05)；
　　2.与对照组治疗24月相比较，治疗组治疗24月MMSE总分明显增高，有统计学意义（P＜0.01）；对照组治疗不同时间相比较：与对照组治疗前相比较，对照组服用安慰剂6月MMSE总分明显降低，对照组服用安慰剂24月MMSE总分降低，差异具有统计学意义（P＜0.05，P＜0.01）；与对照组服用安慰剂6月相比较，对照组服用安慰剂24月MMSE总分显著降低，均有统计学意义（P＜0.05）；治疗组治疗不同时间相比较：与治疗组治疗前及治疗组服用巴西蜂胶6月相比较，治疗组服用巴西蜂胶24月MMSE总分升高显著，差异有统计学意义（P＜0.01)；
　　3.采用酶联免疫吸附试验方法检测：⑴组间比较：与对照组治疗6月相比较，治疗组治疗6月外周血中炎症因子IL-Iβ、IL-6、TGF-β1水平均有统计学意义（P＜0.05）,IL-10、TNF-α水平无统计学意义（P＞0.05)；治疗24月两组外周血中炎症因子水平相比较，IL-Iβ、IL-6、TGF-β1、TNF-α差异均具有统计学意义（P＜0.05）；IL-10无统计学意义（P＞0.05)；
　　⑵组内相比较：①对照组之间相比较：与对照组治疗前及服用安慰剂6月相比较，对照组服用安慰剂24月血清中炎症因子TGF-β、IL-10的水平均增高，IL-6、IL-1β、TNF-α水平均降低，差异有统计学意义（P＞0.05）；
　　②治疗组之间相比较：与治疗组治疗前相比较，治疗组服用巴西蜂胶6月血清中炎症因子 IL-1β水平明显降低，差异有统计学意义（P＞0.05）；与治疗组治疗前及治疗组服用巴西蜂胶6月相比较，治疗组服用巴西蜂胶24月血清中炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α水平显著降低，TGF-β水平显著增高，差异有统计意义（P＜0.05，P＜0.01），IL-10水平差异无统计学意义（P＞0.05）；
　　4.采用逆转录聚合酶链反应方法检测治疗24月两组外周血单核细胞中炎症因子水平相比较，IL-4、IL-6、TGF-β1差异均具有统计学意义（P＜0.05），INF-γ差异无统计学意义（P＞0.05)。
　　结论:
　　1.低氧环境与MCI的发生、发病、后续的进展密切相关，可加速MCI患者的疾病进程，降低MCI患者的认知功能；
　　2.巴西蜂胶能够改善高原地区MCI患者的认知情况，可能起效时间为2年；
　　3.巴西蜂胶可能在低氧环境下通过增强神经保护性的因子TGFβ1和IL-4抗炎作用，并降低炎性因子TNF-α、IL-1β和IL-6的表达来调节血清和外周血单核细胞炎症因子水平，抑制小胶质细胞活性从而提高高原地区MCI患者认知功能。

目录

声明

主要符号对照表

第1章 引言

第2章 对象与方法

2.1 研究对象

2.1.1 MCI诊断纳入标准

2.1.2 入组对象纳入标准

2.1.3 病例分组

2.1.4 一般情况

2.1.5 血液化验

2.1.6 不良反应测定

2.1.7 干预措施

2.1.8 疗效及安全性指标评定

2.2 检查方法及内容

2.2.1 认知功能量表

2.2.2 质量控制

2.3 主要的试剂和仪器

2.3.1 试验所需主要仪器

2.3.2 试验所需主要试剂

2.3.3 患者血液标本的采集

2.3.4 采用酶联免疫吸附（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）法检测外周血清细胞因子(IL-1β、IL-6、IL-10、TGF-β、TNF-α)水平

2.3.5 全血单核细胞RNA提取

2.3.6 逆转录(Reverse transcription，RT)过程

2.3.7 聚合酶链反应（Polymerase Chain Peaction，PCR）过程

2.4 统计学方法

2.5 技术路线图

第3章 结果

3.1 一般情况

3.2 不良反应结果

3.3 巴西蜂胶治疗3个不同时间高原地区MCI患者MMSE评分比较

3.4 入组前对照组与治疗组各炎症因子比较

3.5 巴西蜂胶治疗3个不同时间高原地区MCI患者各炎症因子比较

3.6 巴西蜂胶治疗24月高原地区MCI患者外周血单核细胞炎症因子比较

第4章 讨论

4.1 低氧环境下对高原地区MCI患者认知情况干预的分析

4.2 巴西蜂胶对高原地区MCI患者认知改善情况干预的分析

4.3 巴西蜂胶对高原地区MCI患者外周血炎症因子干预的研究

4.4 巴西蜂胶对高原地区MCI患者单核细胞中炎症因子干预的研究

第5章 结论

参考文献

致谢

附录 综述:高原低氧对AD免疫系统炎症反应的研究

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