猪脂联素和脂联素受体基因的mRNA表达对肌内脂肪含量和背膘厚的影响

摘要

脂联素(Adiponectin，Adipo)是脂肪细胞特异性分泌的一种脂肪细胞因子，通过两个特异性受体(Adiponectin receptor1，AdipoR1；Adiponectin receptor2，AdipoR2)参与调节和糖脂代谢有关的能量稳态。而肌内脂肪(Intramuscular fat，IMF)和背膘厚(Backfat thickness，BFT)则是反映猪肉品品质和瘦肉率的重要指标。本研究以相同体重(114kg)的莱芜猪、鲁莱黑猪和大白猪各12头去势公猪为实验对象，以GAPDH基因为内标，运用QRT-PCR方法，研究了Adipo和AdipoRs基因在莱芜猪、鲁莱黑猪、大白猪三个猪种的背膘、背最长肌和肝脏组织中的表达差异及其与IMF和BFT的相关性，为莱芜猪这一优良的地方猪种资源的开发利用和优质肉猪的培育提供科学依据。研究结果如下： 1.猪的背膘、肌肉和肝脏三种组织中Adipo和AdipoRs基因表达存在着明显的品种间差异，在背膘组织中莱芜猪AdipoR1基因表达水平略高于鲁莱黑猪(P>0.05)，但显著高于大白猪(P<0.05)。肌肉组织中Adipo和AdipoR1基因在不同品种间的表达情况同脂肪组织中AdipoR1基因的表达情况相同，也是莱芜猪中丰度最高(P<0.05)，鲁莱黑猪次之(P<0.05)，大白猪略低(P>0.05)。肌肉和肝脏组织中AdipoR2在不同品种间差异也呈显著水平(P<0.05)，丰度表现为大白猪略高于鲁莱黑猪(P>0.05)，莱芜猪最低(P<0.05)。 2.肌肉组织中不同IMF含量的莱芜猪中Adipo和AdipoR1基因的表达水平存在显著差异(P<0.05)，并且高IMF含量的莱芜猪肌肉组织中的Adipo和AdipoR1基因的表达水平显著高于低IMF含量的莱芜猪(P<0.05)，但中IMF含量的莱芜猪和高IMF的莱芜猪之间没有显著差异(P>0.05)，说明Adipo和AdipoR1基因的表达可能影响了IMF的沉积。 3.Adipo和AdipoRs基因的mRNA表达水平与IMF含量的相关分析表明：在背膘、肌肉和肝脏三种组织中AdipoR1基因的表达均与IMF含量呈显著正相关(P<0.05)，AdipoR2基因的表达均与IMF含量呈显著负相关(P<0.05)，但在背膘组织中，Adipo基因的表达与IMF含量呈显著负相关(P<0.05)，而在肌肉中，Adipo基因的表达与IMF含量呈显著正相关(P<0.05)。Adipo和AdipoRs mRNA表达水平与BFT间相关分析表明：除肝脏中AdipoR1的表达与BFT相关不显著外，在其他两种组织中AdipoR1基因的表达均与BFT成显著正相关(P<0.05)，AdipoR2基因的表达量与BFT成显著负相关(P<0.05)，但背膘中的Adipo基因的表达量与BFT成不显著的负相关，而肌肉中的Adipo基因的表达量却与BFT成显著的正相关(P<0.05)。这表明Adipo基因在不同的组织中发挥的具体功能可能不同，并且Adipo基因在调控IMF与背膘的沉积方面可能有类似的作用，但还需进一步研究验证。

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文摘

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论文说明：英文缩略词

声明

1 引言

1.1 脂肪沉积的调控及相关功能基因的研究进展

1.1.1脂肪组织的发育

1.1.2脂肪代谢基本过程

1.1.3脂肪代谢调控的关键因素

1.1.4肌内脂肪

1.1.5相关功能基因研究进展

1.2脂联素和脂联素受体的研究进展

1.2.1脂联素研究进展

1.2.2脂联素基因的表达

1.2.3脂联素受体基因及其表达

1.3实时荧光定量PCR

1.3.1 荧光阈值和CT值

1.3.2常用的荧光标记方法

1.3.3 绝对定量(Absolute quantification)和相对定量(Relative quantification)

1.3.4实时荧光定量PCR技术的应用概况及展望

1.4本研究的目的、意义及主要内容

2材料与方法

2.1实验动物和样品采集

2.2仪器与试剂

2.2.1试验仪器

2.2.2常规试剂

2.2.3主要生化或分子生物学试剂

2.2.4引物设计及合成

2.3 方法

2.3.1 总RNA的提取、纯化与质量检测

2.3.2反转录

2.3.3荧光定量PCR

2.4肌内脂肪及背膘厚的测定

2.5数据的统计分析

3结果与分析

3.1 IMF和BFT

3.2 品种对背膘、肌肉和肝脏三种组织中Adipo和AdipoRs表达的影响

3.3不同IMF含量的莱芜猪中背膘、肌肉和肝脏三种组织中Adipo和AdipoRs的表达

3.4 Adipo和AdipoRs mRNA表达水平与IMF含量及BFT间的相关分析

4讨论

4.1 品种对背膘、肌肉和肝脏三种组织中Adipo和AdipoRs表达的影响

4.2 Adipo和AdipoRs基因表达与IMF含量的关系

4.3 Adipo和AdipoRs mRNA表达水平与IMF含量及BFT间的相关

5 结论

参考文献

致谢

作者简介

攻读学位期间发表论文情况