声明
符号说明
摘要
1 引言
1.1 核桃炭疽病研究进展
1.2 植物抗病基因研究进展
1.2.1 植物的抗病性
1.2.2 植物R基因的结构特征及分类
1.2.3 植物抗病基因的分离方法
1.2.4 植物RGA标记研究进展
1.3 本研究目的意义
2 材料与方法
2.1 试验材料
2.1.1 植物材料
2.1.2 试剂与设备
2.2 试验方法
2.2.1 核桃炭疽病抗性评价
2.2.2 核桃基因组DNA的提取
2.2.3 DNA浓度及纯度检测
2.2.4 核桃RGA引物设计、PCR扩增、克隆及测序
2.2.5 核桃RGA序列分析
3.结果与分析
3.1 核桃炭疽病抗性评价
3.2 核桃基因组DNA的提取
3.3 核桃RGA的扩增
3.3.1 核桃NBS序列的扩增
3.3.2 核桃LRR序列的扩增
3.3.3 核桃STK序列的扩增
3.4.4 核桃RGA标记与杂交后代抗病性状的卡方检验
3.4 目的片段的回收、连接、转化及阳性克隆的鉴定
3.4.1 核桃NBS序列菌液验证
3.4.2 核桃LRR序列菌液验证
3.4.3 核桃STK序列菌液验证
3.5 核桃RGA序列分析
3.5.1 核桃NBS序列分析
3.5.2 核桃LRR序列分析
3.5.3 核桃STK序列分析
3.5.4 核桃RGA序列的连锁作图
4.讨论
4.1 关于核桃炭疽病抗性评价
4.2 抗病基因类似物标记与植物的抗病性
4.3 核桃的NBS标记
4.4 核桃的LRR标记
4.5 核桃的STK标记
4.6 核桃RGA标记的定位
5.结论
参考文献
附录:相关试剂的配制
致谢
攻读学位期间发表的学术论文