温度对韭菜迟眼蕈蚊储存蛋白的影响和土壤含水量对该害虫生存与生殖的影响

摘要

本文针对韭菜迟眼蕈蚊（Bradysia odoriphaga）的储存蛋白展开研究，探究其幼虫和蛹期体内储存蛋白的主要特性，如分子量、亚基分子量和周期动态变化等特性及不同环境温度对其幼虫期和蛹期储存蛋白含量的影响。同时对韭菜迟眼蕈蚊受土壤含水量的影响做了相应的研究。主要结果如下:
　　1.韭菜迟眼蕈蚊储存蛋白分子量测定及其在血淋巴中动态变化趋势
　　对韭菜迟眼蕈蚊的储存蛋白展开研究，通过提取不同发育阶段的韭菜迟眼蕈蚊幼虫和蛹期的血淋巴蛋白样品，进行变性电泳，结合非变性电泳发现，推测韭菜迟眼蕈蚊储存蛋白为六聚体蛋白，且分子量为471.2 kD。有一种类型的亚基，且亚基的分子量为77.9 kD。韭菜迟眼蕈蚊血淋巴中储存蛋白含量自四龄后期至蛹后期先升高后降低。雌雄虫对比可以看出，预蛹期雄虫体内的储存蛋白明显少于雌虫;初蛹时雌雄虫相差不多。
　　2.不同温度下韭菜迟眼蕈蚊血淋巴、脂肪体中储存蛋白的动态变化
　　通过提取不同温度下韭菜迟眼蕈蚊血淋巴和脂肪体中蛋白样品，进行变性电泳发现，在相同时期的20℃和25℃的血淋巴中，25℃条件下比20℃下韭菜迟眼蕈蚊血淋巴中含有更多的储存蛋白。4个不同温度下（15℃、20℃、25℃和30℃）4龄后期随温度的升高(15℃～30℃)，其体内储存蛋白含量增加。预蛹期随温度的升高(15℃～30℃)，其血淋巴中储存蛋白含量增加。蛹后期4个温度下差异不明显，均含量较低。4龄后期(L41)脂肪体中有很少的储存蛋白，温度对不同阶段的脂肪体含量的影响差异不显著。
　　3.土壤含水量对韭菜迟眼蕈蚊存活率和生殖力的影响
　　通过设置不同土壤含水量条件饲养试虫，观察韭菜迟眼蕈蚊的存活率和生殖力的变化，得出韭菜迟眼蕈蚊适宜的土壤含水量范围为15％～22％。不同土壤含水量对韭菜迟眼蕈蚊的生长发育和生殖力有很大影响，并且对其生长发育的影响因发育阶段不同而异。卵期适宜土壤含水量为10％～22％，幼虫期为15％～20％，蛹期适宜土壤含水量范围为5％～20％。20％土壤含水量条件下的平均产卵量最大为128粒。

目录

声明

摘要

1 前言

1．1 韭菜迟眼蕈蚊研究进展

1．1．1 韭菜迟眼蕈蚊的生物学特性及其危害

1．1．2 环境因子对韭蛆的影响

1．1．3 韭菜迟眼蕈蚊的防治

1．2 温湿度对昆虫影响的研究进展

1．2．1 温度对韭蛆的生长发育的影响

1．2．2 温度对昆虫的影响

1．2．3 土壤含水量对昆虫的影响

1．3 昆虫储存蛋白研究进展

1．3．1 储存蛋白的发现及其意义

1．3．2 储存蛋白的理化性质

1．3．3 储存蛋白的分类

1．3．4 储存蛋白的基因表达调控

1．3．5 蛋白质研究技术

1．3．6 储存蛋白的研究新进展

1．4 本研究的立题依据和目的意义

2 材料与方法

2．1 供试虫源

2．2 韭菜迟眼蕈蚊体内储存蛋白的研究

2．2．1 仪器与试剂

2．2．2 实验所需配置试剂及配方

2．2．3 样品处理

2．2．4 韭菜迟眼蕈蚊血淋巴蛋白浓度测定

2．2．5 蛋白样品的SDS-PAGE分析

2．2．6 蛋白样品的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳

2．3 不同温度处理对韭菜迟眼蕈蚊血淋巴和脂肪体储存蛋白的分析

2．3．1 试虫处理

2．3．2 所需仪器、试剂及处理方法

2．3．3 韭菜迟眼蕈蚊幼虫、蛹期的血淋巴、脂肪体蛋白的提取方法

2．3．4 韭菜迟眼蕈蚊蛋白样品浓度测定、SDS-PAGE和Native-PAGE

2．4 不同土壤含水量对韭菜迟眼蕈蚊的影响

2．4．1 供试昆虫以及饲养方法

2．4．2 不同含水量土壤的配制

2．4．3 研究方法

2．4．4 数据处理

3 结果与分析

3．1 20℃下试虫从未龄幼虫到后期蛹的血淋巴中储存蛋白的动态变化

3．1．1 韭菜迟眼蕈蚊血淋巴可溶性蛋白浓度测定

3．1．2 韭菜迟眼蕈蚊储存蛋白的鉴定及分子特性

3．2 不同温度下韭菜迟眼蕈蚊血淋巴中储存蛋白的动态变化

3．3 不同温度下韭菜迟眼蕈蚊幼虫的脂肪体中储存蛋白的动态变化

3．4 不同土壤含水量对韭菜迟眼蕈蚊的影响

3．4．1 不同土壤含水量对韭菜迟眼蕈蚊的卵孵化率的影响

3．4．2 不同土壤含水量下韭菜迟眼蕈蚊幼虫和蛹存活率的影响

3．4．3 不同土壤含水量下韭菜迟眼蕈蚊生殖力的影响

4 讨论

4．1 不同发育历期韭菜迟眼蕈蚊血淋巴储存蛋白的动态变化

4．2 不同温度下韭菜迟眼蕈蚊储存蛋白的动态变化

4．3 不同土壤含水量对韭菜迟眼蕈蚊的影响

5 结论

创新点

参考文献

致谢