乳酸杆菌和枯草芽孢杆菌对意大利蜜蜂生长发育和免疫指标的影响

摘要

使用益生菌制剂对于维护蜜蜂肠道菌群平衡、保持蜜蜂健康具有重要作用。不同的益生菌对蜜蜂的肠道发育和饲料利用效果不同。本研究选用了两种具有代表性的益生菌制剂——乳酸杆菌和枯草芽孢杆菌，探究饲喂益生菌制剂对意大利蜜蜂采食量、蛋白消化率、中肠围食膜厚度、组织抗氧化能力和免疫性能的影响，以期为蜂用益生菌制剂的选择提供参考。
　　本试验从姐妹蜂王群中取新出房（1日龄）的意蜂3600只，随机分为3个处理组，每组4个重复，每个重复60只蜜蜂。试验Ⅰ组为对照组，饲喂普通油菜花粉，试验Ⅱ组和Ⅲ组饲喂分别添加了1×108 cfu/kg乳酸杆菌制剂和1×108cfu/kg枯草芽孢杆菌制剂的油菜花粉，为试验组。整个试验期30天，期间均保证糖浆（50％蔗糖溶液）和水的充足供应。于试验的第3、6、9天取样，测定存活率，采食量，蛋白消化率，中肠酶活性，抗氧化能力，免疫相关基因表达量等指标并进行分析。结果表明:(1)油菜花粉中添加乳酸杆菌制剂和枯草芽孢杆菌制剂对存活率无显著影响(P＞0.05)，但饲喂添加了乳酸杆菌的花粉能显著提高工蜂在6日龄的采食量。(2)在第3、6、9日龄，试验组相较对照组蜜蜂头胸部蛋白浓度、T-SOD活性显著提升(P＜0.05)，MDA活性显著下降(P＜0.05)，T-AOC活性在第3、6、9日龄均差异显著(P＜0.05)。(3)试验组相较对照组蛋白消化率没有显著差异(P＞0.05)，提示饲料中添加益生菌对蛋白消化率没有影响。(4)肠壁厚度显著增加、隐窝深度降低、围食膜厚度增加(P＞0.05)，试验组蜜蜂中肠发育情况优于对照组。(5)在第9日龄，油菜花粉中添加枯草芽孢杆菌制剂和乳酸杆菌制剂均能显著提高Abeacin和Defense两个抗菌肽基因的mRNA表达量(P＜0.05)，酚氧化酶原PPO基因的表达量降低(P＜0.05)。
　　本研究表明，乳酸杆菌和枯草芽孢杆菌制剂能够促进意大利蜜蜂的生长发育，提高蜜蜂消化酶的活性，提高机体的抗氧化能力，提高两个抗菌肽基因和酚氧化酶原基因的mRNA表达量。

目录

声明

符号说明

摘要

1 前言

1．1 益生菌的发展现状

1．1．1 益生菌的概念

1．1．2 饲用益生菌的作用机理

1．1．3 枯草芽孢杆菌的研究概况

1．1．4 乳酸杆菌的研究概况

1．1．5 益生菌在蜜蜂上的应用

1．2 蜜蜂的消化生理

1．2．1 蜜蜂的消化道

1．2．2 蜜蜂的消化酶

1．2．3 蜜蜂的肠道微生物

1．3 蜜蜂防御病原菌的机制

1．3．1 体壁防御

1．3．2 活性氧防御

1．3．3 抗菌肽

1．4 本研究的目的和意义

2 材料与方法

2．1 试验材料

2．2 试验设计与饲养管理

2．3 测定指标及方法

2．3．1 蜂群的采食量

2．3．2 日粮中蛋白质的消化率

2．3．3 蜜蜂消化酶活性的测定

2．3．4 头胸部的蛋白质浓度

2．3．5 头胸部的抗氧化性

2．3．6 中肠形态学指标

2．3．7 基因表达定量检测

2．4 数据处理

3 结果与分析

3．1 益生菌对不同日龄蜜蜂采食量的影响

3．2 益生菌对蜜蜂存活率的影响

3．3 益生菌对不同日龄蜜蜂日粮蛋白质消化率的影响

3．4 益生菌对蜜蜂头胸部蛋白质浓度的影响

3．5 益生菌对蜜蜂头胸部抗氧化能力的影响

3．5．1 益生菌对蜜蜂头胸SOD活性的影响

3．5．2 益生菌饲粮对蜜蜂头部MDA的影响

3．5．3 不同菌种和不同日龄对蜜蜂头胸部T-AOC的影响

3．6 不同菌种和不同日龄对蜜蜂中肠胰蛋白酶活性的影响

3．7 益生菌对蜜蜂中肠厚度和隐窝深度的影响

3．8 益生菌对蜜蜂抗菌肽相关基因表达量的影响

4 讨论

4．1 益生菌影响意蜂的采食量

4．2 益生茵影响意蜂的肠道发育

4．3 益生菌影响蜜蜂的寿命和抗氧化能力

4．4 益生菌制剂影响蜜蜂的消化酶活性和体蛋白浓度

4．5 益生菌制剂影响蜜蜂的蛋白消化率

4．6 益生菌影响免疫相关基因的表达

5 总体结论、创新点及展望

5．1 总体结论

5．2 本研究的创新点

5．3 存在的不足及进一步解决的问题

参考文献

致谢

8 基金资助