电感耦合等离子体质谱法测定鸡组织中铬的含量

摘要

本课题旨在运用先进的分析方法，从而快速、准确、科学的测定鸡组织器官中重金属铬的含量，通过对鸡组织器官内含铬量的分析并结合兽医临床诊疗技术以诊断鸡铬中毒。本实验采用单因素试验方法，试验选用20只健康60日龄雄性海蓝褐鸡随机分为4组，每组5只，根据重铬酸钾对鸡的半数致死量，分别为0g/kg K2CrO7对照组（CG）、0.2g/kg K2CrO7低剂量组（LG）、0.3g/kg K2CrO7中剂量组（MG）、0.4g/kg K2CrO7高剂量组（HG），接毒组饮用重铬酸钾水溶液，对照组常规饮用清水，对鸡进行为期21天的饮水处理后，宰杀取组织器官。通过微波消解技术消解鸡组织样品心脏，肝脏，肾，脾，肌肉及血清，并对消解液进行赶酸处理。由于鸡组织样品中有机物含量高且机体成分复杂存在不同程度的质谱和非质谱干扰。通过选取52Cr为待测元素，利用碰撞反应池技术CRC中的动能歧视模式KED，采用在线内标72Ge锗和优化仪器参数的方法消除或降低质谱和非质谱干扰。建立碰撞反应池微波消解-电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定重铬酸钾处理鸡组织中铬含量的方法。探讨不同浓度的重铬酸钾对鸡组织心脏、肝脏、脾脏、肾脏、肌肉、血清中铬含量的影响及其铬在鸡组织内的分布规律。结果表明：饮用添加重铬酸钾的水会引起鸡生长发育缓慢，所建立方法的标准曲线线性范围为2ng/mL～50ng/mL，在线性范围内相关系数R2=1，仪器检出限为0.0091ng/mL,方法检出限为0.135ng/mL，定量限为0.448ng/mL均满足测定的要求。精密度试验中(n=8)相对标准偏差小于5%，方法的加标回收率为96.2%～100.2%。通过对10ng/mL质控溶液的8次测定，测定均值为10.964ng/mL，相对标准偏差为4.83%，说明仪器稳定良好。测定鸡肉生物成分国家标准物质（GBW10018）中铬的含量为0.593±0.005μg/g，与标准物质的证书参考值0.59±0.11μg/g基本一致。检测结果表明铬在鸡体内蓄积部位主要是肝脏、肾脏，依次是脾脏，心脏，肌肉，在血清中蓄积的最少。由上述指标考察所建立方法的简便，快速，准确，灵敏度高，适合大批量样品的分析。通过对重铬酸钾处理鸡组织中铬含量的测定，不但确定了铬在鸡组织中分布蓄积的规律，并且对鸡铬中毒的诊断的确立提供了一种辅助检查的方法，为铬中毒诊断试剂的开发提供依据。

目录

声明

符号说明

1 前言

1.1 研究背景和思路

1.1.1 铬污染的国内外现状

1.1.2 铬对养殖业的影响

1.1.3 铬中毒的诊断

1.2铬的理化性质

1.3 铬在动物体内的吸收代谢与运输贮存

1.4铬的毒性及中毒机理

1.5 ICP-MS技术

1.6 ICP-MS干扰及校正

1.6.1质谱干扰及校正

1.6.2 非质谱干扰及校正

1.7碰撞反应池技术

1.8消解方法

1.8.1湿法消解

1.8.2 干灰化法

1.8.3高压消解技术

1.8.4微波消解技术

2 材料与方法

2.1 试验动物和饲养

2.2半数致死量及试验动物分组

2.3 仪器与试剂

2.3.1仪器与设备

2.3.2 主要试剂与溶液

2.3.3 试剂的配制

2.4血清的制备

2.5样品前处理

2.6 铬同位素的选择

2.7 质谱仪参考条件

2.7.1 仪器操作条件

2.7.2仪器的准备

2 .8 测定

2.8.1标准曲线的测定

2.8.2样品的测定

2.8.3 组织中铬含量的计算

2.9 数据统计学分析

3 结果与分析

3.1鸡的临床观察指标

3.2 标准工作曲线

3.3 检出限和定量限

3.4 标准物质GBW10018的测定

3.5仪器的稳定性验证

3.6样品的精密度试验

3.7方法的准确度与精密度试验

3.7.1加标回收试验的过程

3.7.2加标回收试验的结果

3.8样品测定结果

3.8.1肝脏中铬含量

3.8.2 心脏中铬含量

3.8.3 脾脏中铬含量

3.8.4肾脏中铬含量

3.8.5肌肉中铬含量

3.8.6 血清中铬含量

4讨论

4.1 铬对鸡生长发育的影响

4.2所建方法的可行性讨论

4.3 质谱和非质谱干扰的讨论

4.4样品测定分析的讨论

5结论

参考文献

致谢