脂肪乳对布比卡因神经毒性大鼠脑内NMDA受体和GABAA受体表达的影响

摘要

目的：
　　拟探究脂肪乳（LE）在布比卡因致大鼠中枢神经系统毒性模型中对NMDA受体和GABAA受体表达的影响，确定LE是否通过调节脑内NMDA受体和GABAA受体减轻布比卡因所致中枢毒性。
　　方法：
　　1.体重280g-320g健康雄性SD大鼠20只，随机分为2组：布比卡因+生理盐水组（BPV+NS组）、布比卡因+脂肪乳（BPV+LE组），制备布比卡因致大鼠惊厥模型后，两组即刻经尾静脉泵注相应后处理药物，在给予NS或LE后3min、5min、10min、20min、30min、40min、50min、1h均对大鼠进行Tarlov神经功能评分；
　　2.上述健康SD大鼠54只，随机分为3组：假手术组（sham组）、BPV+NS组、BPV+LE组，后两组制备布比卡因致大鼠惊厥模型后分别泵注相应后处理药物，sham组则泵注等体积生理盐水。在药物输注结束后的不同时间点（10min、30min、1h、2h、6h、12h）每组各随机选择3只大鼠断头取出两侧海马组织，采用高效液相色谱法检测其谷氨酸含量；
　　3.参考氨基酸检测结果，我们得知：于输注后处理药物结束后6h取材的大鼠谷氨酸含量较有意义。将上述健康SD大鼠18只随机分为sham组、BPV+NS组、BPV+LE组，造模及给药同上，所有动物在药物输注完毕后6h断头取出脑组织，采用免疫组化法检测海马组织钙调蛋白（CaM）的阳性染色面积，Western Blot检测其NMDA受体及GABAA受体的表达；
　　4.上述健康SD大鼠21只随机分为7组：sham组、BPV+NS组、BPV+LE组、布比卡因+生理盐水+MK-801组（BPV+NS+MK-801组）、布比卡因+脂肪乳+MK-801组（BPV+LE+MK-801组）、布比卡因+生理盐水+L-NAME组（BPV+NS+L-NAME组）、布比卡因+脂肪乳+L-NAME组（BPV+LE+L-NAME组），造模及给药同上，后四组在输注相应后处理药物结束后1h腹腔注射MK-801或L-NAME，所有动物在静脉药物输注完毕后6h断头取脑，采用Western Blot检测其海马组织nNOS活性。
　　结果：
　　1.BPV+LE组在给予后处理药物后3、5、10min三个时间点的Tarlov评分高于BPV+NS组，差异有统计学意义（P<0.01）；
　　2.造模后1h、2h、6h取材的大鼠，BPV+NS组谷氨酸含量高于BPV+LE组（P<0.05），其中6h取材的BPV+NS组谷氨酸含量最高且与同时间点取材的BPV+LE组之间有显著统计学差异；
　　3.造模后6h取材的大鼠中，与BPV+NS组比较，BPV+LE组CaM阳性染色面积减少（P<0.05）,BPV+LE组NMDA受体表达明显降低（P<0.01），GABAA受体表达增高（P<0.05）；
　　4.与sham组比较，BPV+NS+MK-801组、BPV+LE+MK-801nNOS组活性增高（P<0.05）；与BPV+NS组比较，BPV+NS+MK-801组nNOS活性增高（P<0.05）；与BPV+LE组比较，BPV+LE+MK-801组nNOS活性增高（P<0.05）；其他组之间无统计学差异。
　　结论：
　　脂肪乳通过调节NMDA-NO通路和GABAA受体的表达来减轻布比卡因所致大鼠中枢神经系统毒性。

目录

声明

英文缩略词

前言

材料与方法

1.材料

2.实验方法

3.统计学方法

结果

1.Tarlov神经功能评分

2.氨基酸含量

3.Western Blot检测海马组织NMDA受体、GABAA受体的表达

4.免疫组化检测CaM在海马组织CA1区的表达（x 400）

5.Western Blot检测海马组织nNOS的活性

讨论

结论

参考文献

综述:脂肪乳治疗布比卡因毒性反应的临床价值分析

致谢

攻读学位期间发表的学术论文

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