两种组合牧草的体细胞杂交——多花黑麦草（+）青苗碱谷青苗碱谷（+）高冰草

摘要

该文利用PEG方法进行了两种组合牧草的体细胞杂交,组合I为多花黑麦草(Lolium multiflorum)(L)和青苗碱谷(Setaria italica)(S)悬浮系列制备的原生质体的融合.组合II为青苗碱谷(Setaria italica)悬浮系制备的原生质体与高冰草(Agropyrom elongalum)(A)愈伤组织来源的原生质体的融合.多花黑麦草和青苗碱谷的愈伤组织由于长期继代已失去分化能力,其原生质体也不能再生愈伤组织;长期继代的高冰草的愈伤组织仍保留了一定的分化能力,但其原生质体亦不能再生愈伤组织.在实验中将供体青苗碱谷和高冰草进行紫外线处理,以强度为380μW/cm<'2>的紫外线分别照射30sec、1min、2min后与另一亲本的原生质体进行融合.在两个实验中,无论青苗碱谷是否受紫外线照射,杂种克隆的核基因组皆偏向于青苗碱谷,但叶绿体基因组为双亲类型.该文从核基因与胞质基因两方面,对比了两实验中青苗碱谷分别作为供体和受体所起的作用,分析了杂种中以青苗碱谷核遗传物质为主的可能原因.对体细胞杂种中胞质基因的重组与分离以及紫外线辐射在牧草原生质体融合中的剂量效应及对杂种细胞生长的影响也作了讨论.为进一步的牧草体细胞杂交育种,禾草体细胞杂种中叶绿体基因的组成及遗传规律积累了资料.

目录

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符号说明

文献综述

摘要

1.植物体细胞杂交技术进展

1.1融合方法的发展

1.2融合方式的发展

1.3杂种筛选体系及鉴定方法的进展

2.禾谷类植物体细胞杂交进展

2.1水稻的体细胞杂交进展

2.2小麦的体细胞杂交进展

2.3牧草的体细胞杂交

3.实验背景、目的及意义

实验部分

1材料与方法

1.1材料来源

1.2原生质体的游离

1.3紫外线（UV）处理供体原生质体

1.4原生质体融合与培养

1.5再生愈伤组织的鉴定

2结果与分析

2.1融合产物的生长发育

2.2杂种愈伤组织的表型

2.3再生克隆的同工酶分析

2.4再生克隆的染色体分析

2.5再生克隆的RAPD分析

2.6再生克隆的5SrDNA间隔序列分析

2.7再生克隆的SSR分析

3讨论

3.1紫外辐射对融合产物及其发育的影响

3.2再生杂种克隆的染色体排斥

图版说明

参考文献

致谢

攻读学位期间发表的论文