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乏氧诱导因子在正常与牙周炎牙龈组织中的表达差异研究

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摘要

目的:
   当牙周组织慢性创伤、牙周炎症等疾病致牙周组织的微循环障碍时,牙周组织缺氧明显,在正畸治疗过程中,牙齿受力侧的局部缺血情况可以导致牙周组织乏氧。组织乏氧以及炎症过程中释放的一些炎症细胞因子都可以活化乏氧诱导因子(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α);另外,HIF-1α最主要的靶基因血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)不仅可以促进血管的生成而且在骨组织的重塑方面也起着重要作用。因此牙周炎症时牙周袋内的乏氧环境对牙周组织的炎症发展和修复改建有着重要的生物学影响,本实验拟检测HIF-1及VEGF在正常牙龈组织与牙周炎的炎症牙龈组织中的表达差异,探讨HIF-1在牙周炎发生发展及修复中可能的作用。为进一步研究乏氧因子对牙周组织病理变化及组织再生奠定理论基础。
   方法:
   1.标本的选择及实验分组临床随机收集济南市口腔医院年龄20-60岁2008-2009年就诊者40例。其中健康组20例:选择全身健康且无牙周炎,外伤牙折冠延长术中切去的沿龈缘至根方深3mm,宽2mm的正常的牙龈组织,男13例,女7例,平均年龄37.6岁(20~50岁);实验组20例:临床诊断为重度(PD≥6mm)慢性牙周炎患者,牙周翻瓣术中切去的沿龈缘至根方深3mm,宽2mm的牙周袋壁龈组织。男10例,女10例,平均年龄43.5岁(35~60岁)。两组均无全身疾患,3个月内未服用过抗生素,不吸烟者。患者均知情同意。
   2.组织切片将手术所取标本迅速放入4%PFA/PBS固定液4℃固定24h,系列乙醇脱水,二甲苯置换,石蜡包埋,切片,片厚约4μm。切片后分别行HIF-1和VEGF免疫组化染色。采用免疫组织化学PV两步法,检测HIF-1和VEGF在20例健康成人牙龈与20例慢性重度牙周炎患者(PD≥6mm)的炎症牙龈组织中的表达情况。
   结果:
   1.HIF-1免疫组织化学染色结果显示实验组牙龈组织上皮角化层、颗粒层及部分的棘层细胞及结缔组织细胞胞质及胞核有广泛明显棕色、棕黄色阳性染色,健康组牙龈组织上皮细胞及结缔组织细胞无HIF-1阳性染色,实验组上皮层和结缔组织层HIF-1阳性染色与健康组比较,差异均具有统计学意义(P<0.01)。
   2.VEGF免疫组织化学染色结果显示健康组牙龈组织VEGF浅棕色阳性表达局限于上皮的角化层、颗粒层与部分棘层,其下方的结缔组织呈浅棕色弱阳性表达,实验组牙龈组织上皮全层VEGF棕黄色表达,且明显高于健康组上皮全层,两组之间的差异具有统计学意义(p<0.01)。实验组牙龈结缔组织VEGF呈棕黄色阳性表达,且表达明显高于健康组,两组之间的差异具有统计学意义(p<0.05)。
   结论:
   牙周炎的发生发展过程中,HIF-1及VEGF可能参与了牙周炎牙周袋壁龈组织的病理改变过程,在牙周炎发生发展及修复机制中可能具有重要意义。

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