声明
摘要
缩略符号说明
第一章 前言
1.1 抗生素的耐药机制介绍
1.2 整合子
1.2.1 整合子简介
1.2.2 Ⅰ型整合子结构
1.2.3 Pc启动子
1.3 影响Ⅰ型整合子整合酶及基因盒表达的因素
1.3.1 位置效应对基因盒表达水平的影响
1.3.3 cAMP-CRP途径对Ⅰ型整合酶表达的影响
1.4 课题意义及立题依据
第二章 微量抗生素对crp转录水平的影响
2.1 前言
2.2 实验材料
2.2.1 实验菌株
2.2.2 实验所用培养基及其配制
2.2.3 实验所用抗生素及其配制
2.2.4 实验所用溶液及其配制
2.2.5 本章所用引物
2.3 实验方法
2.3.1 实验菌株活化及纯化
2.3.2 细菌总基因组DNA的提取(CTAB法)
2.3.3 crp基因的检测
2.3.6 细菌总RNA提取
2.3.8 qPCR检测微量抗生素对crp转录水平的影响
2.3.9 数据处理
2.4.1 实验结果
2.4.2 本章小结
第三章 实验菌株及双向启动子载体构建
3.1 引言
3.2 实验材料
3.2.1 实验菌株
3.2.2 实验所用培养基及其配制
3.2.4 实验所用溶液及其配制
3.2.5 本章所用引物
3.3 试验方法
3.3.1 用于构建的PCR
3.3.4 crp基因敲除
3.3.5 双向启动子载体构建
3.3.6 Pc+gfp报告基因敲入
3.4 实验结果与讨论
3.4.1 crp基因敲除结果
3.4.2 新构建双向启动子结果
3.4.3 基因敲入结果
3.4.4 本章小结
第四章 微量抗生素对Pint以及Pc转录及表达水平的影响
4.2.3 实验所用抗生素及其配制
4.2.4 实验所用溶液及其配制
4.2.5 实验仪器
4.3.2 诱导实验
4.3.3 细菌总RNA的提取
4.3.4 反转录实验
4.3.7 绿色荧光蛋白的检测
4.4 结果与讨论
4.4.1 Int/1及dfrA1 qPCR检测结果
4.4.2 GFP检测结果
4.4.3 本章小结
第五章 总结与展望
参考文献
硕士期间发表论文
致谢