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淄博地区淋病奈瑟菌临床分离株对环丙沙星的耐药性及parC基因突变的检测

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文摘

英文文摘

引言

1材料和方法

2结果

3讨论

结论

参考文献

文献综述淋病奈瑟菌耐药性的研究进展

攻读学位期间的研究成果

附录

致谢

学位论文独创性声明及学位论文知识产权属声明

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摘要

本文介绍了淄博地区淋球菌耐药性及parC基因变异情况,研究了其与耐环丙沙星之间的关系。为探索建立快速、有效的淋球菌耐药菌株基因检测方法提供依据。 方法:采集51例淄博地区淋病奈瑟菌感染病例标本,通过淋球菌培养、琼脂平板稀释法测定环丙沙星对淋病奈瑟菌最小抑菌浓度MICs,选取高水平耐环丙沙星淋病奈瑟菌菌株(MICs≥4.0μg/ml)30株,设计对应于淋球菌parC基因的PCR引物,通过PCR其目的基因片段并进行DNA序列分析,明确parC基因突变的位点。 结果:51株淋球菌临床分离株对环丙沙星的耐药率为88.24%。3株敏感菌株及30株高水平耐药菌株均经PCR扩增出parC基因片段(255bp),3株敏感菌株测序未发现核苷酸的错义突变,也未见氨基酸的任何突变。测序成功的24株高水平耐药菌株中有22株分别发生1-3个氨基酸的突变,分别在Asp-86→Asn、Ser-87→Asn、Ser-88→Pro、Glu-91→Lys发生基因突变。以Asp-86→Asn突变最为常见,有19株,占测序成功的高水平耐药菌株的79.17% 结论:淄博地区的淋球菌临床分离株对环丙沙星耐药率较高。高水平耐环丙沙星淋球菌parC基因突变呈现多样性。应用PCR和基因测序技术可快速准确检测parC基因的突变,弥补常规药敏试验的不足。

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