几种中药提取物对二斑叶螨和烟粉虱的生物活性及其解毒代谢酶活性测定

摘要

二斑叶螨和烟粉虱是重要的农林害虫，为找到一种合适的生物源农药防治二斑叶螨和烟粉虱，本试验选取百部、半夏、乌头、白屈菜、蛇床子、紫丁香和白头翁7种不同的中药材，用乙醇、丙酮、氯仿3种不同的有机提取剂，采用浸提法和索氏提取法两种不同的提取方法，共获得42种不同的植物粗提物，利用这些植物粗提物对二斑叶螨和烟粉虱分别进行室内生物学活性测定，筛选出7种药效较好的粗提物，测定了相关害虫体内主要解毒代谢酶活性的变化情况。得到以下主要结果:
　　1、所有植物粗提物中，以氯仿的蛇床子提取物(C-SCZ)提取率最高，达21.6％。其次为蛇床子丙酮提取物(B-SCZ)，提取率达19.8％，利用索氏提取法提取的蛇床子乙醇提取物(SE-SCZ)提取率为19.2％。索氏提取的百部乙醇提取物(SE-BB)提取率最低，仅为4.3％。
　　2、生物学活性测定表明，在以浸提法提取的各植物粗提物中，当浓度为5mg·ml-1时，E-BB、B-SCZ和C-SCZ处理24h后二斑叶螨校正死亡率达100％; C-SCZ处理的粉虱24h后校正死亡率达100％。B-BTW杀螨活性最低，24h校正死亡率仅为15.63％,48h校正死亡率为17.39％。B-ZDX杀粉虱活性最低，24h后烟粉虱校正死亡率仅为15.68％,48h粉虱校正死亡率为13.20％。在以索氏提取法提取的各植物粗提物中，当浓度为10mg·ml-1时，SC-WT的杀螨活性最高，处理24h后，二斑叶螨校正死亡率达78.01％; SB-SCZ的杀粉虱活性最高，24h后烟粉虱校正死亡率为72.28％,SB-ZDX杀螨活性最低，24h后二斑叶螨校正死亡率仅为13.95％，48h叶螨校正死亡率为15.89％。
　　3、选择药效较好的几种植物粗提物进行室内毒力测定，结果表明，在以浸提法提取的各植物粗提物中，对二斑叶螨毒力最强的为C-SCZ，致死中浓度LC50为1.6833mg·ml-1，其次依次为E-BB、B-BX、C-BTW和E-WT，LC50分别为4.1440、5.8071、5.9296和6.0029 mg·ml-1。对烟粉虱毒力最高的为蛇床子的氯仿提取物C-SCZ，致死中浓度LC50为3.9144mg·ml-1，乌头的丙酮提取物B-WT毒力次之，致死中浓度LC50为8.7444mg·ml-1。在以索氏提取法提取的各植物粗提物中，对二斑叶螨毒力最强的为SC-WT，致死中浓度LC50为6.6729mg·ml-1，蛇床子的氯仿提取物毒力次之，致死中浓度LC50为7.2161mg·ml-1。对烟粉虱毒力最高的为SB-SCZ，致死中浓度LC50为10.1469mg·ml-1，乌头的丙酮提取物毒力次之，致死中浓度LC50为10.4893mg·ml-1。
　　4、二斑叶螨体内解毒代谢酶测定显示，在处理4h后，叶螨体内AchE、GST、ACP、ALP、CarE都受到显著的抑制(P＜0.05)，药后24h部分酶活性有所升高。对粉虱用药后，对试虫体内各种酶系的影响较为复杂。有的酶受到强烈的抑制，如百部处理后其体内ALP的含量，也有一些酶被激活，如白屈菜粗提物处理后体内MFO的含量变化，还有一些首先受到抑制，而到24h后酶活又显著高于正常值，如乌头粗提物处理后其体内GST的变化情况。

目录

声明

论文说明

摘要

第一章 文献综述

1．1 植物源农药研究概述

1．2 植物源农药应用研究现状

1．3 植物源农药的作用机理

2．1 主要试剂

2．2 主要仪器

2．3 供试植物

2．4 供试昆虫

2．5 几种中药提取物生物学活性测定

2．5．1 供试材料

2．5．2 植物粗提物的制备

2．5．3 几种植物粗提物的毒杀试验

2．5．4 数据统计

2．6 解毒代谢酶比活力测定

2．6．1 试剂配制

2．6．2 各酶液的制备

2．6．3 蛋白质含量测定

2．6．4 羧酸酯酶(CarE)比活力测定

2．6．5 乙酰胆碱酯酶(AChE)比活力测定

2．6．6 谷胱甘肽S—转移酶(GSTs)比活力测定

2．6．7 磷酸酯酶比活力的测定

2．6．8 多功能氧化酶O-脱甲基(MFO)活性测定

2．6．9 数据处理方法

2．7 技术路线

3．1．1 提取率

3．1．2 室内药效试验

3．1．3 室内毒力试验结果

3．2 结论与讨论

第四章 解毒代谢酶比活力测定

4．1 二斑叶螨解毒代谢酶比活力变化

4．1．1 各植物粗提取处理4h后叶螨酶比活力变化

4．1．2 各植物粗提取处理24h后叶螨酶比活力变化

4．1．3 二斑叶螨体内蛋白浓度变化

4．1．4 羧酸酯酶(CarE)活性的变化

4．1．5 乙酰胆碱酯酶(AchE)活性的变化

4．1．6 谷胱甘肽孓转移酶(GSTs)活性的变化

4．1．7 磷酸酯酶(ACP／ALP)活性变化

4．1．8 多功能氧化酶O-脱甲基(MFO)活性变化

4．2 烟粉虱各植物粗提物处理后体内酶活变化

4．2．1 各植物粗提取处理4h后烟粉虱酶比活力变化

4．2．2 各植物粗提取处理24h后烟粉虱酶比活力变化

4．2．3 烟粉虱体内蛋白浓度变化

4．2．4 羧酸酯酶(CarE)活性的变化

4．2．5 乙酰胆碱酯酶(AchE)活性的变化

4．2．6 谷胱甘肽．孓转移酶(GSTs)活性的变化

4．2．7 磷酸酯酶(ACP／ALP)活性变化

4．2．8 多功能氧化酶O-脱甲基(MFO)活性变化

4．3 结论与讨论

参考文献

致谢

作者简介