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转CBF4基因冰草后代植株的分子检测与抗旱性研究

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1引言

2材料与方法

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4讨论

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摘要

本文以转CBF4基因冰革植株自交1代(T1代)植株为材料,进行分子检测和抗性鉴定,获得稳定转化的转基因植株,并确定CBF4外源基因在T1代冰草植株中的整合及表达:对已经确定T1代转基因的冰草植株进行连续干旱胁迫和PEG-胁迫,从中筛选出抗早性强的植株,为培育出抗旱性更强和适应范围更广的冰草新品种奠定基础。
   本研究的初步结果如下:
   1对142株T1代转CBF4基因冰草植株PCR检测,有61株呈阳性。通过点杂交及Southern杂交,确定CBF4基因已经整合到T1代转基因冰草植株中,整合数为2~
   5。Northern杂交结果表明,外源基因CBF4在部分T1代植株中的转录水平表达。
   2在连续干旱胁迫下(先进行干旱胁迫然后复水),与非转基因的对照植株相比,转基因植株的叶片相对含水量下降较慢;质膜透性、丙二醛含量增加较少:脯氨酸增加量较大,显示出较强的抗旱性。
   3 在15%的PEG胁迫下,转CBF4基因冰草植株与未转基因植株相比,转基因植株的叶片相对含水量下降较慢;质膜透性、丙二醛含量增加较少;叶绿素含量较高:脯氢酸、可溶性蛋白增加较大;SOD、POD、CAT活性较高。
   4对冰草植株进行连续干旱胁迫和PEG胁迫后,对其所测定的生理生化指标显示出,转CBF4基因冰草植株的抗旱性明显高于非转基因对照植株,证明CBF4基因在转基因冰草植株中表达。

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