西维来司钠对球囊损伤后Wistar大鼠动脉中膜迁徙平滑肌细胞mRNA表达的研究

摘要

目的： 在动脉粥样硬化形成的过程中，中膜迁徙平滑肌细胞向内膜迁徙并在内膜增殖是极其重要的现象。球囊导管所致的动脉损伤和内膜肥厚的发生机制中，中膜平滑肌细胞的损伤是关键。本研究拟利用球囊损伤Wistar大鼠动脉模型，追踪损伤动脉中膜迁徙平滑肌细胞mRNA随时间变化的表达及西维来司钠对这一过程及其相关因素的影响，探讨西维来司钠对损伤动脉的中膜迁徙平滑肌细胞mRNA影响程度与内膜肥厚的关系。 方法： 选用60只Wistar大鼠(雄性，12周，250g±20g)，将它们的颈总动脉用球囊导管损伤做成损伤模型，随机法分成对照组，持续给药组，5日止给药组和5日始给药组共四组，除5日始给药组外，其他三组分别于术前一天开始投药，对照组给与生理盐水，5日止给药组和持续给药组给与西维来司钠盐溶液，5日始给药组在术后第5天给西维来司钠盐溶液。除5日止给药组于第5天停药，其余三组于术后14天停药。四组术后于1、3、5、7、14天分批处死大鼠。处死前30分钟，按50mg/kg体重静脉注射5-Bromodeoxyuridine(BrdU)。然后应用大鼠胰腺弹性蛋白酶Ⅱ的克隆，原位杂交与免疫组化双重染色，测定动脉损伤后各时期给药中膜BrdU标记弹性蛋白酶mRNA在动脉中膜平滑肌细胞表达的阳性细胞率。同时进行内膜-中膜厚度/内径比的测定。 结果： 对照组BrdU标记mRNA表达阳性细胞率在1-5天增高明显，以后逐渐下降。持续给药组，5日止给药组BrdU标记mRNA表达阳性细胞率在1-5天增高缓慢，与对照组相比存在明显统计学差异；而持续给药组与5日止给药组相比无明显统计学差异；5日始给药组在1-5天出现峰性增高，5天后下降，与对照组无明显统计学差异。在内膜-中膜厚度/内径比的测定上，持续给药组和5日止给药组测定比值低于对照组，且与对照组有明显统计学差异，5日始给药组与对照组在测定比值上无明显统计学差异。 结论： 对照组BrdU标记mRNA表达阳性细胞率在1-5天增高明显，说明损伤后5日内为动脉中膜迁徙性平滑肌细胞增殖的时期，可以称之为增殖期。持续给药组，5日止给药组BrdU标记mRNA表达阳性细胞率在1-5天增高缓慢，说明西维来司钠通过抑制弹性蛋白酶，从而抑制中膜迁徙性平滑肌细胞的增殖，使持续给药组与5日止给药组mRNA表达减弱；而持续给药组与5日止给药组相比无明显统计学差异，说明西维来司钠全程用药和损伤后5日内用药效果相同，进一步说明该药主要作用于损伤后5日内，即增殖期用药。5日始给药组在1-5天出现峰性增高，5天后下降，与对照组无明显统计学差异，说明增殖期后给药作用不明显。在内膜-中膜厚度/内径比的测定上，持续给药组和5日止给药组测定比值低于对照组，且与对照组有明显统计学差异，说明西维来司钠能延缓内膜的增生；5日始给药组与对照组在测定比值上无明显统计学差异说明西维来司钠在5日后给予对增生的内膜作用不明显，从而说明增殖期后给药不能消除增生的内膜。

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综述弹性蛋白酶在动脉粥样硬化的研究进展

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