细胞芯片法在急性白血病骨髓样本免疫分型中的应用

摘要

目的
　　白血病是导致恶性肿瘤死亡的主要疾病之一，其中急性白血病占35岁以下成人肿瘤死亡首位。据统计，在发病率最高的西欧、北美白种人中白血病年死亡率为3.2～7.4/10万人口;发病率低的亚洲、南美洲地区年死亡率为2.8～4.5/10万人口。我国年发病率与死亡率为2～4/10万人口，与欧美等国的类型分布有较明显的差别。在白血病的诊疗中，对白血病进行分型成为关键，不同类型的白血病其诊疗方案不同，疗效及预后也不同。80年代以前白血病的分型主要参照FAB分型标准，采用细胞形态学和组化染色等手段。随着CD的抗体不断被国际协作组确认，MICM分型已成为当今白血病诊断分型、预后判断和残留病变检测的标准。目前临床上进行白血病的免疫分型主要是应用流式细胞术及免疫组化技术，其分型受到标本量、价格、程序等的限制，而且一次实验只能分析1～4个表面抗原，漏掉了大量监测机体免疫状态的表面抗原指标。随着生物芯片技术的发展，学者们开始应用这种高通量、并行性、集成化的技术平台进行白血病的免疫分型研究。本实验在前人的基础上对应用于急性白血病免疫分型诊断的细胞芯片进行深入研究，对急性白血病患者的骨髓样本进行免疫分型，从而快速诊断白血病的类型。实现为临床诊断提供快速、简便、完整的免疫学资料。
　　方法
　　1.将单克隆抗体点在醛基玻片上，细胞悬液滴于细胞芯片，那些有相应CD抗原的细胞只能与相应的单克隆抗体的点结合，进行Wright's染色。
　　2.对65例临床白血病骨髓标本进行分型并验证结果。
　　结果
　　1.65例临床标本的细胞芯片免疫学分型结果:52例AML(ANLL):48例表达CD13(92.31％)，33例表达CD33(63.46％)，18例表达CD15，42例表达HLA-DR;8例B-ALL:8例表达CD79(100％)，7例表达CD19(87.5％)和HLA-DR，7例表达CD10(87.5％)，5例表达CD20(62.5％)，5例表达CD22(62.5％)，;5例T-ALL:5例表达CD3(100％)，5例表达CD7(100％)，4例表达CD2(80％)。
　　2.流式细胞仪对65例临床样本的免疫分型结果:急性髓细胞白血病主要表达CD13(94.23％)、CD33(69.23％);B系ALL高表达CD79(100％)，CD19(87.5％)，CD10(75.0％);T系ALL中CD2，CD3，CD7均为100％表达。
　　3.经Wright's染色后，显微镜下进行白血病细胞形态学分析，65例临床标本的FAB分型结果:M14例，M214例，M310例，M45例，M515例，M64例，L16例，L24例，L33例。
　　结论
　　本实验所得的免疫分型结果与流式细胞仪的白血病免疫分型结果一致，可作为临床白血病免疫学分型的诊断依据。本实验使用的细胞芯片为临床的急性白血病免疫分型提供了一种快速、高通量、并行性、集成化的技术平台。

目录

声明

摘要

英文缩略语

前言

材料和方法

1、材料

2、方法

3、统计学处理

实验结果

1、65例临床标本的细胞芯片免疫学分型结果

2、流式细胞仪对65例临床样本的免疫分型结果

3、两种方法免疫分型的结果比较

4、经Wright’s染色后，显微镜下对细胞芯片进行白血病细胞形态学分析，65例临床标本的FAB分型结果

讨论

结论

本研究创新性的自我评价

参考文献

综述 免疫学分型在白血病诊断中的应用

致谢

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