长链非编码RNA NEAT1促进人骨肉瘤细胞的增殖和侵袭迁移能力的实验研究

摘要

目的:研究长链非编码RNA NEAT1在骨肉瘤细胞系U-2OS中的作用，构建NEAT1表达下调的骨肉瘤细胞株U-2OS，并利用细胞实验检测NEAT1对骨肉瘤细胞株的生物学功能的影响，从而推测NEAT1在骨肉瘤发生发展中的作用及对骨肉瘤患者的影响。
　　方法:1:慢病毒介导的RNA干扰转染骨肉瘤U-2OS细胞系;2:qRT-PCR检测转染后骨肉瘤U-2OS细胞后实验组与对照组NEAT1表达差异;3:MTT法和集落形成实验检测转染后骨肉瘤U-2OS细胞实验组与对照组增殖能力的差异;4:Transwell检测转染后骨肉瘤U-2OS细胞实验组与对照组侵袭和迁移能力的差异。
　　结果:1.用慢病毒干扰骨肉瘤细胞株U-2OS后，qRT-PCR检测发现NEAT1的表达水平显著下调(P＜0.05);2.MTT法检测发现在骨肉瘤细胞株U-2OS中，NEAT1表达下调可以抑制细胞增殖(P＜0.01);3.集落形成实验发现在骨肉瘤细胞株U-2OS中，NEAT1表达下调可以抑制集落形成(P＜0.05)，4.Transwell实验发现在骨肉瘤细胞株U-20S中，NEAT1表达下调对骨肉瘤细胞的侵袭和迁移能力有影响，且其差异有统计学意义(P＜0.05)。
　　结论:1.在骨肉瘤细胞株U-2OS中，NEAT1表达下调能够减少骨肉瘤细胞增殖、抑制骨肉瘤细胞的侵袭和迁移能力;2.NEAT1在骨肉瘤的发生及转移中可能起致癌作用，NEAT1有可能成为治疗骨肉瘤的药物靶点。

目录

声明

摘要

英文缩略语

1 前言

2．1．1 主要试剂

2．1．2 主要仪器及耗材

2．1．3 慢病毒载体及细胞株

2．2 方法

2．2．1 细胞培养

2．2．2 慢病毒干扰骨肉瘤细胞株U-2 OS

2．2．3 qRT-PCR检测慢病毒转染目的细胞后NEAT1表达情况

2．2．4 细胞增殖实验(MTT法)

2．2．5 集落形成实验

2．2．6 细胞侵袭和转移实验

2．3 统计学方法

3 结果

3．2 NEAT1表达下调抑制骨肉瘤细胞的体外增殖能力

3．3 NEAT1表达下调抑制骨肉瘤细胞的体外侵袭和转移的能力

4 讨论

5 结论

本论文创新性自我评价

参考文献

综述 LncRNA在骨肉瘤中的研究进展

攻读学位期间取得的研究成果

致谢

个人简历