高血糖对大鼠脑缺血再灌注ICAM-1、TNF-α表达及白细胞浸润的研究

摘要

目的:缺血性脑卒中是高致死率、高致残率疾病.临床和动物实验证实高血糖与缺血性脑卒中关系密切,但糖尿病、高血糖、高血糖控制和脑卒中结果之间的关系还存在争议.高血糖加重脑缺血后神经损伤机制包括无氧代谢的增强致酸中毒;兴奋性氨基酸毒性作用;高血糖破坏血脑屏障,促进梗死后出血转化;一氧化氮的毒性作用.其中最常见的是酸中毒学说,但是有学者持反对意见.该研究观察高血糖条件下脑缺血再灌注后细胞间粘附分子(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)和肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)表达及白细胞浸润情况,探索高血糖对脑缺血再灌注影响的可能机制.方法:36只雄性SD大鼠(体重180-220g)随机分成3组:正常血糖组(n=16)、高血糖组(n=16)和假手术组(n=4),其中高血糖组和正常血糖组按再灌注2h、4h、6h和24h分为4个亚组.假手术组:颈部正中切口,暴露颈总动脉后缝全皮肤.观察组:高血糖组采用缺血前30分钟腹腔注射葡萄糖建立高血糖模型(正常血糖组腹腔注射等量生理盐水).用Longa--Zea氏线栓法复制脑缺血再灌注模型,10﹪水合氯醛(30-40mg/Kg)腹腔注射麻醉大鼠,手术分离并结扎右侧颈外动脉、颈总动脉,在颈总动脉分叉处的下方剪一小口,经此小口插入备好的线栓(直径0.20mm高弹力鱼线,插线头烧成圆头,临用时蘸取肝素),经颈内动脉入颅至大脑前动脉,结扎颈内动脉,缝全皮肤.缺血2小时后拔出线栓.分别于再灌注后2h、4h、6h和24h(每个小组4只)处死动物,迅速断头取全脑速冻15min,行冠状切片,用2﹪红四氮唑(TTC)染色后拍照,用图像分析系统测量梗死体积.免疫组织化学法和HE染色观察不同再灌注时间点TNF-α、ICAM-1阳性表达及白细胞浸润计数.分别比较高血糖组和正常血糖组不同再灌注时间点TNF-α、ICAM-1表达和白细胞浸润计数;比较相同再灌注时间点高血糖组和正常血糖组TNF-α、ICAM-1表达和白细胞浸润计数.结论:ICAM-1、TNF-α介导白细胞和内皮细胞粘附及向脑缺血区浸润过程,ICAM-1、TNF-α表达及白细胞浸润参与了高血糖加重脑缺血再灌注损害过程.

目录

前言

材料和方法

结果

讨论

结论

参考文献

附图

综述 高血糖与缺血性脑血管病

参考文献

致谢