替莫唑胺联合乙胺嘧啶对垂体腺瘤αT3-1细胞系增殖影响的研究

摘要

目的:观察替莫唑胺(Temozolomide，TMZ)联合乙胺嘧啶(Pyrimethamine，PYR)对垂体腺瘤αT3-1细胞系增殖的影响，探讨药物治疗无功能型垂体腺瘤的新方法。
　　 方法:细胞增殖抑制试验:以CCK-8法测定TMZ，PYR单药，TMZ联合PYR给药对无功能型垂体腺瘤细胞αT3-1的抑制率。细胞凋亡试验:以流式细胞检测技术测定TMZ，PYR胆药，TMZ联合PYR给药对αT3-1细胞凋亡的影响。细胞周期检测:以流式细胞检测技术测定TMZ，PYR单药，TMZ联合PYR给药对αT3-1细胞周期的影响。免疫组织化学TUNEL染色:使用共聚焦显微镜观察TMZ，PYR单药，TMZ联合PYR给药对αT3-1细胞形态的影响。WesternBlot:使用WesternBlot技术检测TMZ，PYR单药，TMZ联合PYR给药对αT3-1细胞内细胞凋亡相关蛋白的表达。
　　 结果:TMZ或者PYR单药能浓度依赖地抑制αT3-1细胞增殖，而联合小剂量的TMZ和PYR能够显著的抑制αT3-1细胞增殖(P＜0.05);100μmol/LTMZ能够促进αT3-1细胞凋亡，而联合小剂量的TMZ和PYR(0.5μmol/L)能够显著促进αT3-1细胞的凋亡(P＜0.05);100μmol/L的TMZ可以使αT3-1细胞阻滞在细胞周期的S期，联合小剂量的TMZ和PYR(0.5μmol/L)能够使更多的αT3-1细胞阻滞在细胞周期的S期。联合小剂量的TMZ和PYR(0.5μmol/L)能够使显著促进αT3-1细胞发生细胞凋亡形态学改变，产生凋亡小体。联合小剂量的TMZ和PYR(0.5μmol/L)能够使显著增多的αT3-1细胞的凋亡相关蛋白BAX、PRAP、H2AX等表达增高，抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低。
　　 结论:TMZ与PYR联合用药可以更好的抑制αT3-1细胞的增殖，促进αT3-1细胞的凋亡，为无功能型垂体腺瘤患者经常规治疗无效后提供了新的药物治疗选择。

目录

声明

摘要

前言

材料和方法

1 实验材料

2 试验方法及步骤

结果

1 TMZ，PYR单药和TMZ联合PYR给药及细胞活力分析

2 TMZ、PYR单药和TMZ联合PYR给药对αT3-1细胞的促凋亡作用

3 TMZ，PYR单药和TMZ联合PYR给药对αT3-1细胞周期的影响

4 TMZ，PYR单药和TMZ联合PYR给药对αT3-1细胞形态的影响

5 TMZ，PYR单药和TMZ联合PYR给药对αT3-1细胞Caspase．3／7、8、9活性的影响

6 TMZ，PYR单药和TMZ联合PYR给药对αT3-1细胞细胞凋亡，抗凋亡相关蛋白表达的影响

讨论

结论

参考文献

综述

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