声明
摘要
引言
1 文献综述
1.1 骨组织工程
1.2 种子细胞
1.2.1 干细胞
1.2.2 人脂肪干细胞
1.2.3 人脂肪干细胞的表面标记
1.2.4 人脂肪干细胞的多向分化潜能
1.3 支架材料
1.3.1 支架材料简介
1.3.2 海藻酸盐支架材料
1.4 骨粉
1.5 生物反应器
1.5.1 生物反应器在组织工程中的应用
1.5.2 生物反应器的分类
1.6 选题依据
2 海藻酸钙/骨粉微胶珠的优化制备
2.1 实验器材与仪器
2.1.1 实验试剂及药品
2.1.2 实验仪器
2.2 微胶珠的实验室制备方法
2.2.1 骨粉的制备方法
2.2.2 骨粉的表征
2.2.3 微胶珠的制备方法
2.2.4 制备不同工艺的微胶珠
2.2.5 微胶珠耐浸泡试验
2.2.6 微胶珠传质性能实验
2.3 结果与讨论
2.3.1 骨粉的形态
2.3.2 骨粉的粒度分布
2.3.3 骨粉的红外吸收光谱
2.3.4 海藻酸钙/骨粉微胶珠的形态
2.3.5 微胶珠的机械强度
2.3.6 微胶珠的传质性能
2.3.7 微胶珠的制备工艺的优化
2.3.8 微胶珠优化组的机械强度
2.3.9 微胶珠优化组的传质性能
2.4 小结
3 脂肪干细胞的分离与培养
3.1 实验材料及方法
3.1.1 实验药品及试剂
3.1.2 实验材料
3.1.3 实验仪器
3.1.4 实验溶液及试剂的配置
3.2 实验方法
3.2.1 脂肪干细胞的原代培养
3.2.2 脂肪干细胞的传代培养
3.2.3 脂肪干细胞的免疫组化鉴定
3.2.4 脂肪干细胞荧光染色
3.2.5 脂肪干细胞生长曲线的测定
3.2.6 脂肪干细胞的成骨诱导
3.3 结果与讨论
3.3.1 脂肪干细胞的形态
3.3.2 脂肪干细胞的免疫组化
3.3.3 脂肪干细胞的荧光染色
3.3.4 脂肪干细胞的生长曲线
3.3.5 脂肪干细胞的成骨诱导
3.4 小结
4 脂肪干细胞在微胶珠内的骨向分化
4.1 实验材料及方法
4.1.1 实验药品及试剂
4.1.2 实验仪器
4.2 实验方法
4.2.1 脂肪干细胞的包埋方法
4.2.2 脂肪干细胞包埋密度的确定
4.2.3 微胶珠内细胞的死活染色
4.2.4 微胶珠内细胞的增殖
4.2.5 微胶珠内细胞的成骨诱导
4.2.6 碱性磷酸酶(ALP)的定量检测
4.2.7 ALP染色
4.2.8 茜素红染色
4.2.9 von-Kossa染色
4.3 结果与讨论
4.3.1 脂肪干细胞包埋前后的形态
4.3.2 脂肪干细胞的最佳包埋密度
4.3.3 细胞的死活染色
4.3.4 细胞在微胶珠内的增殖
4.3.5 ADSCs的成骨诱导分化
4.3.6 碱性磷酸酶(ALP)的定量检测
4.3.7 ALP染色
4.3.8 茜素红染色
4.3.9 von-Kossa染色
4.4 小结
结论
参考文献
附录A 英文缩略语
攻读硕士学位期间发表学术论文情况
致谢