微囊化异体坐骨神经组织细胞移植对大鼠脊髓损伤后c-fos表达的影响

摘要

目的：将具有免疫隔离效应的海藻酸钠微囊包被同种异体雪旺细胞，并进行移植用于脊髓损伤的治疗研究，通过免疫组织化学方法观察脊髓损伤后进行微囊化神经组织细胞移植c-fos表达的变化。 方法：无菌条件下取大鼠双侧坐骨神经制成组织细胞悬液，低速离心后与1.5％海藻酸钠溶液混合并喷入20mmol/L的氯化钡溶液中制成微囊化坐骨神经组织细胞。95只成年Sprague-Dawley（SD）大鼠随机分为4组：微囊组（A组）、细胞悬液组（B组）、单纯损伤组（C组）和假手术组（D组）：假手术组为5只；其他3组每组各30只，大鼠于T8右侧半横断损伤后，分别植入明胶海绵吸附的微囊化坐骨神经组织细胞、明胶海绵吸附的坐骨神经组织细胞悬液及明胶海绵，术后6h、12h、24h、3d、7d、14d，每组各5只大鼠，4％多聚甲醛经心-升主动脉灌注后取出损伤区尾侧脊髓约2节段和相应部位的脊神经节，D组大鼠则取相应部位的脊髓和脊神经节。石蜡切片后行免疫组织化学染色，结合图像分析技术观察c-fos在脊髓后角和前角和脊神经节（dorsalrootganglion，DRG）内含量的变化。 结果：脊髓半横断损伤后6h时，c-fos阳性神经元数升高，同时阳性细胞累积光密度（IOD）值也升高，c-Fos蛋白可见在灰质表达增多，前角和后角都有阳性细胞表达但主要出现在后角。损伤后12h开始出现下降，随后在24h又出现升高，都高于假手术组（4.05±0.38）。单损组的c-fos阳性细胞在3d后开始减少，术后7d、14d单损组与假手术组比较无明显意义（P<0.05）。微囊组的c-fos表达在6h、12h、24h、3d都明显低于单损组和细胞悬液组，其差别有统计学意义（P<0.05）。细胞组在6h和12h与单损组比较有统计学意义（P<0.05）。各组在7d和14d无统计意义（P>0.05）。 结论：（1）微囊化细胞移植能降低脊髓c-fos的表达，对脊髓半横断损伤后的神经元有保护作用。（2）微囊化雪旺细胞移植可能通过使c-fos的表达下调而在一定程度上降低了脊髓的继发性损伤。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略词表

声明

第1章 引 言

第2章 材料和方法

2.1主要试剂和仪器

2.2 实验方法

2.3统计学处理

第3章结果

3.1 移植物的制备情况

3.2 动物模型

3.3 脊髓组织石蜡切片HE染色

3.4 c-fos免疫组化染色

第4章 讨 论

4.1.脊髓损伤与修复

4.2 SCs与脊髓损伤

4.3 微囊技术在脊髓损伤修复中的应用

4.4 c-fos基因在神经系统的相关研究

4.5 e-fos基因与脊髓损伤

4.6 雪旺细胞移植对脊髓损伤后c-fos基因的作用及其机制

第5章 结论与展望

5.1 结论

5.2 实验不足之处及进一步工作的方向:

致 谢

参考文献

附 图

综 述 c-fos基因与脊髓损伤研究进展

攻读学位期间的研究成果