莲副产物中原花青素的结构、抗氧化活性及降脂作用的研究

摘要

莲在采摘后的生产过程中，莲副产物（包括莲蓬和莲壳）多被当作废料丢弃,得不到有效的利用。本文以莲副产物为原料，主要研究了莲蓬和莲壳中原花青素的结构表征、体外抗氧化活性（DPPH和ABTS清除效果）、对人脐静脉内皮细胞的氧化损伤保护作用、莲原花青素在大鼠体内的代谢作用及其对高脂诱导肥胖小鼠的降脂作用。主要研究方法、结果和讨论如下：
　　1.经响应面优化超声波辅助提取莲壳中的原花青素，得超声波辅助提取原花青素的最佳条件为：超声时间21 min、超声功率720 w、丙酮浓度70％、液料比33:1 mL/g，获得莲壳原花青素的含量为43.96 mg/g。
　　2.利用紫外、红外及HPLC-QTOF-MS/MS鉴定莲副产物中原花青素的成分，在莲蓬和莲壳粗提物中分别都分析出21种活性物质，其中莲蓬粗提物中检测出原花青素19种，莲壳粗提物中检测出原花青素15种，他们的组成单元为儿茶素、表儿茶素、没食子儿茶素和表没食子儿茶素。莲蓬和莲壳中原花青素的主要结构为二聚体和三聚体的原花青素。
　　3.通过研究莲副产物中原花青素粗提物对DPPH和ABTS自由基清除能力，发现莲原花青素粗提物在DPPH、ABTS体系中抗氧化能力均优于同浓度的异抗坏血酸。其中莲壳与莲蓬原花青素都表现出很高的DPP H清除能力，莲壳原花青素 DPPH自由基清除能力略高于VC，而莲蓬原花青素清除能力为VC的2.26倍；莲壳原花青素与莲蓬原花青素ABTS自由基清除能力分别是VC的2.15倍和7.61倍。用低、中、高三个浓度的莲原花青素粗提物预处理人脐静脉内皮细胞，再用500 mM H2O2诱导细胞氧化损伤，发现加入莲原花青素的实验组，对细胞损伤具有良好的保护作用。
　　4.莲壳和莲蓬的原花青素粗提物，经乙醚、三氯甲烷和乙酸乙酯依次有机去杂后，再用大孔树脂（填料为AB-8）进行纯化，得到莲壳和莲蓬纯化后的原花青素纯度分别为71.34%和76.51%。用纯化后莲原花青素配制成浓度为1500 mg/Kg原花青素悬浊液灌喂大鼠，用HPLC-QTOF-MS分析代谢产物，得到27种相关产物。主要的代谢产物为酚酸（香草酸、对香豆酸等）、香豆酸硫酸盐、3-O-甲基儿茶素-5-or7-O-硫酸盐，三甲基没食子酸等。
　　5.用低浓度（25 mg/kg）和高浓度（100 mg/kg）莲OPC纯化物灌喂高脂膳食小鼠，连续灌喂八周后，结果表明莲蓬和莲壳原花青素提取物均表现出较为明显的降脂效果。其中莲蓬高浓度组降脂效果最为明显，其血脂中TC、TG和LDL-C水平与高脂组相比分别下降45.45、34.25和43.53%，肝脏中TC、TG和LDL-C水平与高脂组相比分别下降46.83、33.93和42.71%。莲蓬高浓度组血液中瘦素、丙氨酸转移酶、天冬氨酸转移酶和碱性磷酸酶水平与高脂组相比分别降低了55.87、46.74、22.33和5%，肝脏中抗氧化酶、谷胱甘肽-S-转移酶、谷胱甘肽活性分别为高脂组的1.62倍、3.36倍和1.28倍，而MDA活性为高脂组的0.59倍。

目录

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第1章 绪论

1.1 概述

1.2 原花青素

1.3 本课题研究的目的、意义及主要内容

第2章 响应面法优化莲壳原花青素超声提取工艺研究

2.1 引言

2.2 材料与设备

2.3 实验方法

2.4 莲壳原花青素提取优化结果与分析

2.5 本章小结

第3章 莲原花青素的制备及结构表征

3.1 引言

3.2 材料与设备

3.3 实验方法

3.4 结果

3.5讨论

3.6 本章小结

第4章 莲原花青素的抗氧化活性研究

4.1 引言

4.2 材料与设备

4.3 实验方法

4.4 结果

4.5 讨论

4.6本章小结

第5章 莲原花青素的纯化及其体内代谢分析

5.1 引言

5.2 材料与设备

5.3 实验方法

5.4 实验结果与分析

5.5 讨论

5.6 本章小结

第6章 莲原花青素纯化物对小鼠的降脂功效

6.1 引言

6.2 材料与设备

6.3 实验方法

6.4 结果与分析

6.5 讨论

6.6 本章小结

第7章 结论与展望

7.1 结论

7.2 进一步工作方向

致谢

参考文献

攻读学位期间的研究成果