致奶牛乳腺炎葡萄球菌快速诊断及药敏试验方法的改进

摘要

为了进一步提高致奶牛乳腺炎诊断方法的快速、简便和实用性，本研究在已有葡萄球菌选择培养基基础上，以刃天青钠作为指示剂，成功对致奶牛乳腺炎葡萄球菌快速诊断及药敏试验方法进行改进。改进的mBP-RS培养基具有良好的特异性和敏感性，葡萄球菌在其中生长良好，并且颜色发生明显变化，不支持大肠杆菌和链球菌等细菌生长;模拟奶样与细菌纯培养试验结果一致;能在乳腺炎相关细菌混合组合中鉴定出葡萄球菌。采集临床奶样101份，用mBP-RS培养基进行快速诊断，结果表明能在12h内对是否有葡萄球菌感染作出明确诊断，并对感染程度做出判断，试验结果既可用肉眼观察，也可用分光光度计检测。用改进mBP-RS培养基对101份奶样进行快速诊断试验，结果显示葡萄球菌单独感染31份，混合感染33份，与标准法比较，诊断敏感性可达98.3％，特异性可达95％。
　　为了建立乳腺炎相关葡萄球菌快速药敏试验方法，在mBP-RS培养基基础上，用不同浓度抗生素进行葡萄球菌快速药敏试验，并与标准纸片扩散法比较，发现mBP-RS培养基对少数抗生素的抑菌活性有不同程度的影响，需要对其浓度进行适当校正。用校正浓度的抗生素进行快速药敏试验，所得结果与纸片法一致。对模拟奶样进行快速药敏试验，结果与细菌纯培养结果高度一致。对临床奶样进行葡萄球菌快速药敏试验，所得结果与标准方法符合率可以达到95.8％。临床奶样所含细菌对氨苄青霉素、青霉素G耐药，对氧氟沙星、头孢噻肟、头孢唑啉普遍敏感，对链霉素、红霉素、新生霉素、四环素的敏感程度因奶样不同而异。
　　致奶牛乳腺炎葡萄球菌快速诊断及药敏试验试剂盒的改进，可以更加快速直观地对临床奶样进行检测，对有否葡萄球菌感染及其抗生素敏感性做出明确的诊断，并具有特异性强、灵敏性高等优点。特别适用于基层中小型奶牛场，拥有广阔的应用前景。

目录

摘要

符号说明

论文综述：奶牛乳腺炎研究进展

1 概述

2 主要致病微生物

3 乳腺炎的致病机制

4 监测和诊断方法

5 奶牛乳腺炎的预治措施

6 刃天青的应用研究进展

研究内容一：致奶牛乳腺炎葡萄球菌快速诊断方法的改进

1 材料

1．1 实验菌株

1．2 培养基及其他试剂

1．3 主要仪器和设备

2 方法

2．1 葡萄球菌培养动态观察

2．2 选择培养特性测定

2．3 模拟奶样葡萄球菌培养

2．4 模拟奶样混合细菌培养

2．5 模拟奶样重复性试验

2．6 奶样采集

2．7 临床奶样快速检测

3 结果

3．1 葡萄球菌培养动态观察

3．2 选择培养特性测定

3．3 模拟奶样葡萄球菌培养

3．4 模拟奶样混合培养

3．5 模拟奶样重复性试验

3．6 临床奶样快速诊断结果

4 讨论

研究内容二：致奶牛乳腺炎葡萄球菌快速药敏试验方法的改进

1 材料

1．1 实验菌株

1．2 培养基及其他试剂

1．3 主要仪器与设备

2 方法

2．1 抗生素的选择与配制

2．2 最小抑菌浓度确定

2．3 纸片扩散法药敏试验(参照CLSI2010方法)

2．4 抗生素浓度校正

2．5 模拟奶样药敏试验

2．6 临床奶样药敏试验

3 结果

3．1 抗生素浓度矫正

3．2 校正浓度抗生素的快速药敏试验

3．3 模拟奶样药敏试验

3．4 临床奶样药敏试验

4 讨论

参考文献

致谢

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