腺苷A2A受体拮抗剂对左旋多巴治疗帕金森病诱发异动症大鼠影响的实验研究

摘要

第一部分左旋多巴治疗帕金森病诱发异动症大鼠模型的制备及行为学评价
　　 目的：帕金森病(PD)大鼠腹腔注射左旋多巴(L-DOPA)，制备PD大鼠异动症(LID)模型，对其行为学进行评价。
　　 方法：选取26只SD大鼠，6-羟多巴胺(6-hydroxydopamine，6-OHDA)立体定向注射至大鼠右内侧前脑束，制备单侧损毁PD大鼠模型，2周后行大鼠颈部皮下注射阿朴吗啡诱发旋转试验，≥7r/min者为成功PD大鼠模型。将20只成功PD大鼠随机分为2组(每组10只)：分别予L-DOPA(L-DOPA25mg/kg+6.25mg/kg苄丝肼)和与L-DOPA相同容积的生理盐水(NS)腹腔注射，每日2次，持续治疗21天，治疗第2、9、11、18和21天进行前肢功能测定、异常不自主运动(abnormal involuntarymovement，AIM)评分和对侧旋转反应时间测定。
　　 结果：1、生理盐水组治疗前后左侧前肢跨步数无显著差异(P>0.05)，在21天治疗时间里始终未出现AIM及对侧旋转；L-DOPA组治疗后较治疗前左侧前肢跨步数显著增加(P<0.01)。2、L-DOPA组10只大鼠中有9只在21天治疗时间里出现不同程度的AIM，随着治疗时间的延长，AIM程度越来越严重；L-DOPA组AIM总分从治疗第9天开始随时间延长而逐渐增加，第18、21天较第2天AIM总分显著增加(P<0.01)。3、L-DOPA组对侧旋转反应时间随治疗时间的延长逐渐缩短，第11、18、21天和第2天相比显著缩短(P<0.05)。
　　 结论：L-DOPA治疗PD诱发异动症大鼠出现的AIM和PD患者服用L-DOPA出现的LID在许多方面具有相似之处，为LID的深入研究提供了理想的动物模型。
　　 第二部分腺苷A2A受体拮抗剂CSC对左旋多巴诱发异动症大鼠行为、皮质纹状体突触超微结构的影响
　　 目的：评价腺苷A2A受体拮抗剂8-(3-Chlorostyryl)caffeine(CSC)对左旋多巴(L-DOPA)诱发异动症(AIM)大鼠行为、皮质纹状体突触超微结构的影响。
　　 方法：选取50只SD大鼠，6-羟多巴胺(6-hydroxydopamine，6-OHDA)立体定向损毁大鼠右内侧前脑束，2周后行大鼠颈部皮下注射阿朴吗啡诱发旋转试验，≥7r/min者为成功PD大鼠模型。采用随机数字表法，将40只成功PD大鼠分为4组(每组10只)：生理盐水组；L-DOPA25mg/kg+6.25mg/kg苄丝肼组；CSC2.5mg/kg组；CSC2.5mg/kg联合L-DOPA25mg/kg+6.25mg/kg苄丝肼组；腹腔注射，每日2次，持续治疗21天。治疗第2、9、11、18和21天观察行为学变化，并采用透射电镜观察大鼠皮质纹状体突触后致密物质(PSD)厚度、突触间隙和穿孔性突触比率的变化。
　　 结果：1、L-DOPA组治疗后较治疗前跨步数显著增加(P<0.05)，但有疗效减退趋势：L-DOPA联合CSC组治疗后较治疗前跨步数显著增加(P<0.01)，在21天治疗时间里无疗效减退趋势，改善程度不随时间延长而减弱；CSC组治疗后较治疗前左侧前肢跨步数显著增加(P<0.05)，有疗效逐渐增加至稳定趋势。2、L-DOPA联合CSC组部分口颌及肢体AIM评分较L-DOPA组显著减少(P<0.05)。3、L-DOPA联合CSC治疗使L-DOPA诱导的对侧旋转反应时间缩短得到显著的改善(P<0.05)。4、L-DOPA组大鼠穿孔性突触比率显著增多，突触间隙变窄，PSD厚度显著增加(P<0.05)；CSC联合L-DOPA治疗明显减少穿孔性突触比率和PSD厚度，突触间隙显著增宽(P<0.05)。
　　 结论：1、腺苷A2A受体拮抗剂CSC单独应用改善了PD运动减少症状；联合L-DOPA治疗增强L-DOPA的抗PD效应且部分减轻AIM；CSC减弱了L-DOPA诱发异动症大鼠皮质纹状体突触活性的过度增强。2、LID的发生发展与皮质纹状体突触活性增强密切相关，腺苷A2A受体拮抗剂对LID大鼠皮质纹状体突触活性增强有改善作用。