重楼皂苷Ⅰ与重楼皂苷Ⅱ对胶质细胞U251的抑制作用及其机制研究

摘要

目的:研究重楼皂苷Ⅰ(PSⅠ)与重楼皂苷Ⅱ(PSⅡ)对胶质瘤细胞U251的体外抑制作用及其机制。
　　方法:体外常规培养胶质瘤细胞株U251。用PSⅠ与PSⅡ分别处理胶质瘤细胞株U251,并设空白对照组。噻唑蓝(MTT)法测定PSⅠ与PSⅡ对胶质瘤细胞株U251的体外抑制作用;Hoechst33258荧光染色检测细胞核发生凋亡的形态变化;采用流式细胞术(FCM)FITC-AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡变化; Western blotting检测 Fas、Caspase-8和Caspase-3蛋白表达情况。
　　结果:MTT分析表明PSⅠ与PSⅡ均能抑制U251细胞增殖,并呈时间和剂量依赖性, PSⅠ对胶质瘤细胞U251有极明显的抑制作用; PSⅡ的抑制作用次之(P<0.05)。Hoechst33258荧光染色显示典型的凋亡特征。经PSⅠ与PSⅡ处理后U251细胞的早期凋亡率明显高于对照组(F=81.434,P=0.000)。两者均使U251细胞Fas、Caspase-8和Caspase-3表达上调,差异有统计学意义(P<0.05)。
　　结论:PSⅠ与PSⅡ对胶质瘤细胞均有明显的体外抑制作用,其作用机制与上调Fas、Caspase-8和Caspase-3表达促进细胞凋亡有关。

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引言

材料与方法

1 材料

1.1 实验试剂

1.2实验仪器

1.3实验细胞

2实验方法

2.1 细胞培养、传代和PSI与PSII溶液制备

2.2 MTT实验观察PSI与PSII对胶质瘤细胞株U251的体外抑制作用

2.3 Hoechst33258染色观察PSI与PSII处理U251细胞后细胞核凋亡的形态学变化取对数生长期U251细胞接种于6孔板，每孔接种3×105，培养24 h后，根据计

2.4流式细胞仪检测细胞凋亡率

2.5 Western blotting检测Fas、Caspase-8 和Caspase-3蛋白的表达

2.6 统计学处理

结果

讨论

参考文献

结论

附图

综述

主要缩略词表

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