右美托咪定抑制HMGB1/TLR4/NF-кB信号通路减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤

摘要

第一部分:右美托咪定预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤后炎症因子TNF-α和IL-6水平的影响
　　目的：观察右美托咪定预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤后心肌组织和血清中炎症因子水平的变化。
　　方法：250～300g的健康雄性SD大鼠65只，随机分为5组（每组n=13）：假手术组（Sham组）；心肌缺血再灌注组（I/R组）；右美托咪定预处理+缺血再灌注组（DEX组）；右美托咪定+育亨宾+缺血再灌注组（DEX/YOH组）；育亨宾预处理+缺血再灌注组（YOH组）。心肌缺血再灌注损伤模型的制备：阻断左冠状动脉前降支30min再灌注120min。于再灌注120min时采血并处死大鼠摘取心脏，采用ELISA法测定心肌组织和血清中TNF-α和IL-6的浓度，采用TTC染色法测定心肌梗死面积，采用HE染色法观察心肌组织的病理变化情况。
　　结果：与Sham组相比较，I/R组大鼠心肌梗死面积明显增大（P<0.01），心肌组织和血清中TNF-α和IL-6浓度也显著增高（P<0.01）；与I/R组比较，右美托咪定预处理明显降低心肌组织和血清中TNF-α和IL-6浓度（P<0.01），并且显著减少心肌梗死面积（P<0.01）；与DEX组相比，DEX/YOH组心肌组织和血清中TNF-α和IL-6含量均显著增高（P<0.05），心肌梗死面积明显增大（P<0.01）；I/R，DEX/YOH和YOH组比较，没有明显统计学差异。HE染色发现：DEX组与I/R组相比，心肌纤维比较，少有断裂、肿胀，心肌组织中炎症细胞浸润明显减少，心肌细胞坏死明显减少。
　　结论：右美托咪定预处理明显减少缺血再灌注损伤的大鼠心肌组织和血清中的IL-6和TNF-α的浓度，减轻炎症反应。
　　第二部分:右美托咪定预处理对HMGB1/TLR4/NF-кB信号通路的影响及机制
　　目的：观察右美托咪定预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤后心肌组织中HMGB1、TLR-4、MyD88和NF-кB蛋白含量的影响。
　　方法：250～300g的健康雄性SD大鼠40只，随机分为5组（每组n=8）：假手术组（Sham组）；心肌缺血再灌注组（I/R组）；右美托咪定预处理+缺血再灌注组（DEX组）；右美托咪定+育亨宾+缺血再灌注组（DEX/YOH组）；育亨宾预处理+缺血再灌注组（YOH组）。心肌缺血再灌注损伤模型的制备：阻断左冠状动脉前降支30min再灌注120min。于再灌注120min即刻处死大鼠，摘取心脏并提取心肌组织蛋白，采用Western blot法和免疫组化法分别测定心肌组织HMGB1、TLR-4、MyD88和NF-кB蛋白的含量。
　　结果：与Sham组相比，I/R组心肌组织HMGB1、TLR-4、MyD88和NF-кB蛋白含量明显升高（P<0.01）；与I/R组比较，右美托咪定预处理显著降低心肌组织各个蛋白含量（P<0.01）；与DEX组相比，DEX/YOH组心肌组织各个蛋白含量明显升高（P<0.05）；I/R，DEX/YOH和YOH组比较，没有明显统计学差异。
　　结论：右美托咪定预处理降低心肌缺血再灌注损伤心肌组织中HMGB1，TLR-4，MyD88和NF-кB蛋白的含量，减轻缺血再灌注损伤的炎症反应，并且可能是通过α2受体发挥作用。