探讨木酚素/肠内酯激活GPER通路对前列增生的抑制作用

摘要

目的:通过观察木酚素体内抑制大鼠前列腺增生(BPH)的效果，体外探讨木酚素代谢产物肠内酯是否激活G蛋白偶联的雌激素受体(G Protein-Coupled Estrogen Receptor1/GPER)信号通路来抑制大鼠前列腺增生。
　　方法:32只雄性Wistar大鼠（约200g)随机分为开环异落叶松树脂酚二葡萄糖苷（Secoisolariciresinol Diglycoside，SDG）治疗组、非那雄胺（Finasteride）治疗组、模型组与生理盐水空白对照组，每组8只大鼠；每日皮下注射丙酸睾酮（Testosterone Propionate，TP)（5mg/kg/d），连续注射28天建立TP诱导的大鼠前列腺增生模型。SDG治疗剂量40mg/Kg/d，非那雄胺治疗量0.1mg/Kg/d，均经灌胃给予，治疗时间4周；实验结束时获取大鼠前列腺，计算前列腺指数，前列腺组织HE染色观察前列腺组织形态，免疫荧光检测GPER的表达情况。体外培养人前列腺基质细胞（WPMY-1），SDG体内代谢产物肠内酯（Enterolactone,ENL）按1μΜ、5μΜ、10μΜ、20μΜ浓度分别处理24h后,采用MTT实验检测细胞增殖情况；分别用20μΜ肠内酯和GPER特异性激动剂G-1处理人前列腺基质细胞24h后进行细胞周期测定，并且采用蛋白印迹检测GPER、p-ERK、P53、P21、CyclinD1的表达。
　　结果:
　　①体内试验发现，与模型组比较，SDG治疗组大鼠前列腺指数明显减少，与非那雄胺组前列腺指数比较无差异；前列腺HE染色显示，SDG组前列腺上皮和基质细胞的假复层的厚度减少，腺体形态大致恢复，免疫荧光染色实验进一步发现SDG治疗组组前列腺细胞膜上GPER受体水平显著增加。
　　②体外试验发现，肠内酯组的人前列腺基质细胞系WPMY-1细胞增殖受到抑制，细胞周期阻滞于G1期，Western检测发现与抑制细胞增殖相关的基因p-ERK、P53、P21基因表达增加，而细胞周期蛋白CyclinD1表达降低。
　　结论:
　　①木酚素能够抑制大鼠前列腺的增生；
　　②木酚素的体内代谢产物肠内酯是通过结合GPER并激活GPER/ERK信号通路，抑制前列腺基质细胞增殖,将细胞阻止于G0/G1期，来实现抑制前列腺增生的。

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前言

材料和方法

一、实验材料

二、实验步骤及方法

结果

实验背景

讨论

参考文献

综述;植物药物治疗良性前列腺增生的现状

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