白术水煎剂对H2O2诱导的小鼠脑微血管内皮细胞bEnd.3细胞凋亡的影响

摘要

目的:探讨学习白术水煎剂对H202诱导小鼠脑微血管内皮细胞bEnd.3细胞凋亡的影响。
　　方法:首先体外培养小鼠脑微血管内皮细胞bEnd.3细胞，使其达到对数生长期，然后利用H2O2致该细胞株凋亡从而建立凋亡模型。加入药品和试剂，使得分组情况如下:H2O2模型组、H2O2加白术水煎剂低、中、高剂量组以及空白组。运用MTT法检测各组OD值，根据各组细胞活力/％=该组OD值/正常空白对照组OD值×100％，从而反映白术水煎剂对该模型的细胞活性的影响;运用Western Blot法检测各个分组的Bax/Bcl-2、Cyt C/β-actin、cleaved-caspase-3/pro-caspase-3的比值，从而反映白术水煎剂对凋亡相关蛋白表达的影响。上述实验操作都重复3次以上，数据处理采用SPSS18.0软件，用均数±标准差((x)±s)表示。当需要比较两个独立样本组间均数时，运用t检验;当需要多组间比较时，运用单因素方差分析，结果以P＜0.05表示差异，具有统计学意义。
　　结果: MTT法示白术水煎剂对H2O2诱导的小鼠脑微血管内皮细胞bEnd.3细胞凋亡有抑制作用，并且随着白术水煎剂浓度的上升而上升，呈浓度依赖性(P＜0.05)。Westernblot示白术水煎剂干预后的小鼠脑微血管内皮细胞Bend3细胞凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2、Cyt C/β-actin、cleaved-caspase-3/pro-caspase-3的比值随着浓度的上升而下降，呈浓度依赖性(P＜0.05)。
　　结论:白术水煎剂对H2O2致bEnd.3细胞凋亡起到保护作用，原因可能是其在凋亡路径反应中起到抑制作用。

目录

声明

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摘要

前言

第一部分 综述

综述一 多系统萎缩的现代学研究进展

1、多系统萎缩的概念

2、流行病学

3、病因

4、病理

5、发病机制

6、临床分型

7、诊断标准

8、辅助检查

9、治疗与预防

综述二 多系统萎缩的中医学研究进展

1．中医对MSA的病名的认识

2．中医对MSA的病因病机的认识

3．中医对MSA辨证论治的研究

4．中医药治疗MSA的进展

第二部分 临床部分

1．验案举例

2．心得体会

第三部分 实验研究

1．实验材料

1．1 实验对象

1．2 实验仪器

1．3 试剂耗材

1．4 中药水煎剂制备

2．实验方法

2．1 细胞培养

2．2 实验分组

2．3 MTT法

2．4 Western blot检测

3．统计学处理

4．实验结果

5．讨论

第四部分 讨论

1．理论依据

1．1 现代医学对MSA的认识

1．2 中医学对MSA的认识

2．白术治疗MSA的分析

参考文献

致谢

附录