贵州大叶贯众提取物抗水疱口炎病毒有效成分的研究

摘要

大叶贯众为鳞毛蕨科(Dryopteridaceae)贯众属植物，据《贵州蕨类植物志》记载，该植物主要分布于我国云南、四川、湖南、湖北、贵州、江西等地。在《贵州药用植物名录》、《贵州中药资源》中均有收录，其干燥根茎及叶柄残基均可入药，具有清热解毒、凉血止血和抗菌之功效。药用植物贯众种类繁多，目前国内外研究的焦点和热点多集中在商品贯众的化学成分和药理活性上，而对贵州大叶贯众的研究较少。所以本研究选取大叶贯众为对象，对其进行了以下研究。
　　试验Ⅰ:大叶贯众提取物成分的初步分析
　　为初步了解提取物的化学组成，对大叶贯众药用部位进行乙醇回流法提取和分部萃取，并对提取物的化学组成进行初步分析。结果表明大叶贯众提取物中总黄酮含量约为27.6％，总酚类的含量约为30.8％，鞣质的含量约为11.2％。使用气相-质谱联用仪(GC/MS)对其易挥发性成分进行了检测，证明提取物中主要含有糖醛、油酸、正十六烷酸、L-蛋氨酸和邻苯二酚等物质。通过高效液相色谱(HPLC)检测，并与标品对照，发现提取物中含有儿茶素和槲皮素-3-O-葡萄糖苷。
　　试验Ⅱ:大叶贯众提取物体外抗水疱口炎病毒活性研究
　　对各萃取部位进行了细胞安全浓度测试，结果表明各萃取部位的最高安全浓度为250μg·mL-1。将各萃取部位用细胞培养液分别从250μg·mL-1倍比稀释至15.625μg·mL-1，5个浓度，测试体外抗水疱口炎病毒(Vesicular Stomatitis Virus，VSV)效果。结果表明先加各萃取部位和与病毒同时加入细胞两组中，水部位、二氯甲烷部位和乙酸乙酯部位的抗病毒作用较显著，其中水部位的抗病毒作用显著(P＜0.05)，且浓度在125μg·mL-1时抗VSV病毒效果最好。
　　试验Ⅲ:大叶贯众提取物抗水疱口炎病毒有效成分的分离纯化
　　通过反复硅胶柱色谱分离、高效制备液相和凝胶过滤等分离纯化方法，从提取物的水部位的Fr.Ⅲ组分中分离纯化出2个化合物，经波谱技术初步鉴定分别为槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷-3'硫酸化钠盐和槲皮素-3-O-半乳糖苷两种黄酮类物质。为进一步研究大叶贯众抗病毒作用的机制和物质基础提供参考。

目录

声明

摘要

符号及缩略语

第一篇 文献综述

第一章 鳞毛蕨科贯众属植物化学成分及药理活性研究进展

1 贵州鳞毛蕨贯众属植物资源简介

2 贯众属植物化学成分研究进展

3 贯众属植物药理活性研究

4 小结

参考文献

第二章 大叶贯众简介

1 植物形态

2 化学组成

3 性昧和归经

4 本草考证

5 小结

参考文献

第二篇 试验研究

第三章 大叶贯众提取物的初步分析

1 材料与方法

2 结果与讨论

3 小结

参考文献

第四章 大叶贯众提取物体外抗水疱口炎病毒活性研究

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

4 小结

参考文献

第五章 大叶贯众抗水疱口炎病毒有效成分的分离纯化

1 材料与方法

2 结果与讨论

3 小结

参考文献

全文总结

附录

致谢