树鼩单纯疱疹病毒角膜炎感染模型建立及14-脱羟-11,12-二脱氢穿心莲内酯琥珀酸半酯钾钠盐对其药效学的研究

摘要

单纯疱疹病毒角膜炎（herpes simplex keratitis，HSK）是全球角膜炎疾病中发病较高、致盲率较高、较难以治疗的疾病，且病情易反复，治疗周期长，给人们的工作生活带来极大痛苦，并且近年来发病率还呈上升趋势。树鼩是与灵长类最为接近的动物，其角膜结构约98％与人类相似，是用来构建角膜炎模型较为理想的动物。
　　本文通过利用两种单纯疱疹病毒HSV-117+和HSV-1 Mckrea分别诱导建立两种单纯疱疹病毒角膜炎模型，并研究14-脱羟-11，12-二脱氢穿心莲内酯琥珀酸半酯钾钠盐对其治疗效果。在构建模型过程中发现HSV-1 Mckrea诱导建立的单纯疱疹病毒角膜炎模型与HSV-117+诱导建立的模型相比，具有死亡率低及不用划痕感染的优势。
　　观察了14-脱羟-11，12-二脱氢穿心莲内酯琥珀酸半酯钾钠盐对HSV-1 Mckrea诱导建立的单纯疱疹病毒角膜炎模型的疗效。高(125 mg/ml)、中（62.5 mg/ml）浓度组在治疗14天后均取得较好的治疗效果，甚至优于阿昔洛韦阳性对照组;低浓度(31.25mg/ml)组也有一定疗效，但不如高、中浓度组明显。
　　用qPCR方法分析了给药治疗的树鼩角膜中病毒复制情况，发现14-脱羟-11，12-二脱氢穿心莲内酯琥珀酸半酯钾钠盐及阿昔洛韦均可抑制HSV-1病毒在体内的复制。14-脱羟-11，12-二脱氢穿心莲内酯琥珀酸半酯钾钠盐组的抑制率略高于阿昔洛韦组，且对病毒的抑制表现出浓度依赖性。几种炎症因子的qPCR测定结果表明，在治疗过程中穿心莲与阿昔洛韦均能够通过抑制促炎因子IL-1β与IL-6基因的表达、促进IFN-γ基因的表达而起到抗炎作用。

目录

声明

摘要

第一章 文献综述

1 疹病毒角膜炎(HSK)研究进展

1．1 HSV-1病毒基因与复制

1．2 HSK的发病机理

1．3 HSK临床表现

2 穿心莲研究进展

2．1 穿心莲的主要成分

2．2 穿心莲药理作用

3．3 实验设计与实验目的

第二章 构建树鼩单纯疱疹病毒(HSV-1 17+)角膜炎模型并观察14-脱羟-11，12-二脱氢穿心莲内酯琥珀酸半酯钾钠盐对其治疗效果

1 材料和方法

1．1 实验动物和材料

1．2 研究方法

2 实验结果与分析

2．1 单纯疱疹病毒17+诱导树鼩角膜炎模型的构建

2．2 14-脱羟穿心莲内酯对HSV-1 17+诱导的树鼩角膜炎的治疗效果研究结果

3．讨论

4．本章小结

第三章 构建树鼩单纯疱疹病毒(HSV-1 Mckrea)角膜炎模型并观察14-脱羟-11，12-二脱氢穿心莲内酯琥珀酸半酯钾钠盐对其治疗效果

1 材料和方法

1．1 实验动物和材料

1．2 研究方法

2．实验结果与分析

2．1 单纯疱疹病毒(HSV-1 Mckrea)诱导树驹角膜炎模型的构建

2．2 14-脱羟穿心莲内酯对HSV-1 Mckrea诱导的树驹角膜炎的治疗效果研究结果

3．讨论

3．本章小结

第四章 14-脱羟-11，12-二脱氢穿心莲内酯琥珀酸半酯钾钠盐治疗树鼩HSV-1角膜炎过程中相关病毒与炎症因子mRNA表达的qPCR分析

1 材料与方法

1．1 实验材料与试剂

1．2 主要仪器

1．3 树鼩角膜组织总RNA的提取

1．4 树鼩角膜组织cDNA的合成

1．5 qPCR荧光定量检测

2．实验结果与分析

2．1 14-脱羟穿心莲内酯治疗HSV-1 17+划痕感染诱导引起的树鼩角膜炎感染模型病毒基因qPCR结果分析

2．2 14-脱羟穿心莲内酯治疗树鼩HSV-1 Mckrea诱导引起的角膜炎感染模型病毒基因qPCR结果分析

2．3 14-脱羟穿心莲内酯治疗HSV-1感染诱导引起的树鼩角膜炎感染模型炎症因子qPCR结果分析

3．讨论

4．本章小结

全文总结

创新之处

参考文献

致谢