功能苯甲酰胺化β-环糊精手性固定相的点击制备及手性分离应用

摘要

随着人们对手性药物药理学特性的不断研究，手性药物分离引起广泛关注。高效液相色谱技术(HPLC)具有快速分析、高分析量和高灵敏度检测的特点，已经被广泛应用于手性药物的纯度分析以及制备领域中。基于环糊精优良的手性识别能力，大量环糊精类手性固定相继被开发出，并且在色谱领域内展现出强大的应用前景。本论文通过点击反应制备了两种苯甲酰胺化β-环糊精化学键合硅胶基质的手性固定相，并将其装填成手性色谱柱，在高效液相色谱不同模式下，考察了其色谱柱性能和手性拆分能力。
　　利用苯环上不同位置吸电子基（氯）和供电子基（甲基）的苯基异氰酸酯，合成两种全取代6A-叠氮基-β-环糊精，进而与炔基化硅胶通过点击反应制备β-环糊精类手性固定相，命名为全(4-氯-3-甲基苯甲酰胺基)-β-环糊精键合硅胶手性固定相(CSP1)和全(5-氯-2-甲基苯甲酰胺基)-β-环糊精键合硅胶手性固定相(CSP2)。
　　在高效液相色谱反相和正相模式下，以3'-羟基黄烷酮为标准物，对两根色谱柱进行准确性、精密度以及线性相关性评价实验。在两种模式下，对芳醇和芳胺类物质、黄酮类物质、肾上腺素和安息香类物质以及FMOC-氨基酸类物质等29种外消旋体进行手性拆分实验。研究表明反相模式下固定相的拆分效果优于正相模式，CSP1的拆分能力优于CSP2。CSP1能对16种物质实现基线分离，反相模式下，对5种黄酮类物质达到4.0以上的分离度，其中，对3'-羟基黄烷酮能达到8.69的分离度;正相模式下，对4种黄酮类物质达到4.0以上的分离度。而CSP2仅对4种黄酮类物质和1种FMOC-氨基酸手性物质实现基线分离，并且在反相模式下，对3'-羟基黄烷酮仅能达到2.8的分离度。
　　基于高效液相色谱两种模式下的结果，科学分析了手性固定相的拆分机理。反相模式下，两种固定相均以β-环糊精包合作用为基础，通过衍生化基团与外消旋体产生的分子间作用力来实现手性识别;正相模式下，流动相极性弱，非极性溶剂占据了β-环糊精内腔，β-环糊精的衍生化基团与外消旋体产生的分子间作用力，成为固定相进行手性拆分的驱动力。正相模式下，FMOC-氨基酸类物质在两种固定相中不能获得分离，而在反相模式下获得了分离。功能化苯甲酰胺基β-环糊精中取代基位置对手性拆分性能有着不同的影响，引入间、对位取代基的苯基增强了CSP1的手性拆分能力，而邻、间位取代基的苯基却减弱了CSP2的手性拆分能力。

目录

声明

摘要

1 绪论

1．1 手性及手性分离

1．1．1 手性

1．1．2 手性分离

1．2 高效液相色谱法

1．2．1 高效液相色谱法的发展历史

1．2．2 高效液相色谱法分类

1．2．3 高效液相色谱仪器系统

1．2．4 高效液相色谱法分离方法

1．3 β-环糊精类手性固定相的发展现状

1．3．1 环糊精

1．3．2 β-环糊精类手性固定相

1．4 本论文的设计路线、创新点及研究内容

1．4．1 本论文的设计路线和创新点

1．4．2 本论文的研究内容

2 CSP1和CSP2两种固定相的制备

2．1 实验药品及仪器

2．1．1 实验药品

2．1．2 实验仪器

2．2 合成部分

2．2．1 β-环糊精衍生物的合成

2．2．2 CSP1和CSP2固定相合成

2．2．3 色谱柱装填

2．3 本章小结

3 CSP1和CSP2两种固定相在高效液相色谱中的应用

3．1 实验前准备

3．1．1 实验药品及仪器

3．1．2 样品及流动相缓冲液配制

3．2 高效液相色谱方法优化

3．2．1 检测波长

3．2．2 柱温选择

3．2．3 流速迸择

3．2．4 柱压选择

3．3 两根色谱柱性能评价

3．3．1 塔板数

3．3．2 精密度评价

3．3．3 线性相关性评价

3．3．4 重现性评价

3．4 CSP1和CSP2两种固定相在高效液相色谱反相模式下的手性分离应用

3．4．1 芳醇和芳胺类物质的手性分离

3．4．2 黄酮类物质的手性分离

3．4．3 肾上腺素和安息香类、FMOC-氨基酸类物质及氯杀鼠灵的手性分离

3．4．4 反相模式下手性分离小结

3．5 CSP1和CSP2两种固定相在高效液相色谱正相模式下的手性分离应用

3．5．1 芳醇和芳胺类物质的手性分离

3．5．2 黄酮类物质和氯杀鼠灵的手性分离

3．5．3 正相模式手性分离小结

3．6 固定相手性拆分机理分析

3．7 本章小结

4 结论

致谢

参考文献

攻读硕士学位期间发表的论文和出版著作情况