连续多次辅助富血小板血浆(PRP)与贫血小板血浆(PPP)对自体脂肪移植影响的实验研究

摘要

背景:作为一种软组织填充材料和技术，自体脂肪移植已经踏过了一个多世纪的发展历程。相比其他填充材料，自体脂肪具有来源充足、获取简便、无排斥反应、应用范围广泛以及疗效自然和长久等独特优点。而不确定性的低成活率与时常发生的液化、坏死、钙化和结节等并发症是其一直所面临的最主要问题，亟待解决。影响脂肪移植成活率和移植质量的因素是多方面的，所以解决的方法和途径也应当是综合的，促进移植早期血管生成是尤为关键的手段之一，也是当前研究的热点。富血小板血浆(PRP)含有人体丰富的生物活性物质，已被广泛应用于多个医学领域。因此，探索富血小板血浆对脂肪移植的作用是非常值得研究的课题。
　　 目的:通过富血小板血浆和贫血小板血浆(PPP)连续三次辅助自体脂肪移植的方法，探讨两者对移植的作用并进行了相互比较，旨在探索一种更为有效的脂肪移植方法，为临床应用提供实验依据。
　　 方法:选取1例接受吸脂手术的25岁健康女性大腿后外侧区作为供区脂肪，采用10ml注射器连接2mm口径吸脂管，手动形成负压抽吸脂肪，漂洗静置法纯化脂肪颗粒。抽取同一捐献者外周静脉血，经两次200×g离心10min后，收集PRP和PPP，将PRP和PPP分别与10％氯化钙溶液以10∶1混合，置于4℃冰箱12小时以激活血小板。选取5周龄雌性裸鼠36只，体重20g±3g，根据处理方法不同，将其随机分成PRP组、PPP组与生理盐水组（对照组），每组12只，每只裸鼠左右两侧背部皮下设为2个注射移植区域。将脂肪颗粒分成三份，一份与PRP以10∶2比例混合用于PRP组，一份与PPP以相同比例混合用于PPP组，一份与生理盐水以相同比例混合用于对照组。在移植后5、10天时，三组分别再次注射对应辅助剂0.14ml。于首次移植后15、30、90、180天，三组分别随机选取3只裸鼠取材用于大体观察，测定组织块重量与体积;组织学观察，计算坏死面积比、微血管数和有效脂肪存活率。
　　 结果:裸鼠均成活至实验完成，三组移植部位均未出现感染、破溃情况。横切面观察，各时间点PRP组液化与坏死情况均好于对照组(P＜0.016)，而PRP组与PPP组、PPP组与对照组之间均无显著差异(P＞0.016)。15、30、90天时PRP组组织块重量及体积均明显大于PPP组和对照组(P＜0.05)，但PPP组与对照组之间无显著差异(P＞0.05);到180天时PRP组与对照组之间的重量和体积却无显著差异(P＞0.05)，但两者均明显大于PPP组(P＜0.05)。15天时PRP组组织学坏死面积比低于对照组(P＞0.05)，但PRP组与PPP组之间没有显著差异(P＞0.05);30、90、180天时PRP组进一步明显低于PPP组和对照组（P＜0.05），此外PPP组各时间点都低于对照组(P＜0.05)。PRP组微血管数各时间点都明显高于PPP组和对照组(P＜0.05)，而PPP组与对照组之间却无显著差异(P＞0.05)。PRP组有效脂肪存活率各时间点一直明显高于PPP组和对照组(P＜0.05)，同时PPP组也一直高于对照组(P＜0.05)。
　　 结论:在180天内，连续多次辅助PRP和PPP都可以提高脂肪移植存活率以及移植质量，而PRP对脂肪移植的促进作用明显大于PPP。PRP能够促进移植脂肪血管生成，PPP则不能。

目录

声明

摘要

前言

正文

1 材料与方法

1．1 实验动物与主要试剂、仪器

1．2 脂肪颗粒制备

1．3 富血小板血浆制备

1．4 实验分组及移植方法

1．5 取材

1．6 观测指标

1．7 统计学方法

2 结果

2．1 大体观察

2．2 重量

2．3 体积

2．4 H-E染色

2．5 组织学坏死面积比

2．6 微血管数

2．7 有效脂肪存活率

3 讨论

4 结论

参考文献

综述

攻读学位期间发表文章情况

致谢