霍山石斛缓解视疲劳产品配方、工艺及安全性、有效性研究

摘要

霍山石斛是主产于安徽大别山腹地的一种珍稀道地药材，因其种子无胚乳，萌发困难，植物为气生根生长于高海拔的山间岩石缝隙中，生长环境要求苛刻，再加上野生资源的过渡开采，现已濒临灭绝，被国家认定为2级野生保护植物。由于霍山石斛资源的匮乏导致相关的实际应用研究极少，多数学者的研究还是局限于含量的测定，未见到霍山石斛化学成份的系统研究，导致霍山石斛临床应用研究缺乏理论基础。
　　本课题从配伍增效、最佳制剂工艺优选质量可控、安全有效三个递进层次研究安全、有效、规模化生产的技术体系，开展产品配方筛选、制剂工艺优选、产品质量标准编制、中试生产验证、产品稳定性、安全性和有效性等方面的系统研究。主要研究内容和结论如下：
　　1.产品配方筛选、制剂工艺优选、产品质量标准编制及中试生产验证
　　（1）确定产品组方为霍山石斛、叶黄素，霍山石斛折算成生药材日推荐量为2 g/日，叶黄素日推荐量为14.4 mg/日，产品配方主要原料选择为霍山石斛提取物和叶黄素20％油混悬液。
　　（2）选择产品剂型为软胶囊剂，采用玉米油为本品内容物的稀释剂并作为软胶囊的基质，蜂蜡作为本品的助悬剂，焦糖色加入到胶囊皮中作为遮光剂。考察了加水量、提取次数、提取时间三个因素对霍山石斛提取效果的影响，通过正交试验优选了提取工艺，最佳提取工艺为：药材加10倍量水，提取3次，每次2小时。
　　（3）起草编制出产品的质量标准。
　　（4）按照国家保健食品 GMP生产规范的要求进行连续三批次的中试生产验证性试验，确认实验室研究成果能够应用于实际工业化生产中。
　　2.产品稳定性考察
　　通过加速实验，对产品感官指标、理化指标、卫生学指标和标志性成分指标的变化情况进行了考察。结果表明，各项指标无明显变化，建议霍山石斛缓解视疲劳软胶囊的保存方法为：避光密闭，并置于阴凉干燥处保存。产品保质期暂定为24个月。
　　3.产品安全性研究
　　（1）为研究产品的致突变、致畸形等安全性指标，对本品开展了三致试验，试验结果均为阴性。
　　（2）为评价产品的急性毒性，对本品开展了急性经口毒性试验研究，结果表明本试验条件下的霍山石斛缓解视疲劳软胶囊雌、雄性小鼠急性经口MTD大于15000 mg/kg·bw，根据急性毒性剂量分级标准，产品属无毒级。
　　（3）进行30天喂养试验，以提出较长期喂饲不同剂量的受试物对动物引起有害效应的剂量和靶器官，估计亚慢性摄入的危害性，试验研究表明霍山石斛缓解视疲劳软胶囊以实际剂量雌性为3.96 g/kg·bw/d、2.56 g/kg·bw/d、1.17 g/kg·bw/d（相当于人体推荐量的119倍、77倍、35倍），雄性为3.80 g/kg·bw/d、2.45 g/kg·bw/d、1.13 g/kg·bw/d（相当于人体推荐量的114倍、74倍、34倍）的剂量给予大鼠30天，受试动物情况良好，检查结果显示，各项指标均在正常范围，产品未观察到有害作用。
　　4.产品有效性研究
　　（1）进一步评价产品的临床使用安全性，试食者试食霍山石斛缓解视疲劳软胶囊前后红细胞、白细胞、血红蛋白、血小板、血清总蛋白、丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、肌酐、尿素氮、尿、大便常规等均在正常范围，霍山石斛缓解视疲劳软胶囊对人体未见不良影响。
　　（2）对产品有效性进行人体试食试验，症状改善有效率及积分、明视持久度具有统计学意义，研究结果表明霍山石斛缓解视疲劳软胶囊具有缓解视疲劳功能。

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第一章 绪论

1.1 霍山石斛的研究概况

1.2 本课题的立题背景、意义

1.3 主要研究内容

第二章 产品配方筛选、制剂工艺优选、质量标准编制及中试生产验证研究

2.1 产品配方筛选

2.2 产品制剂工艺优选

2.3 产品质量标准编制

2.4 中试生产验证

2.5 本章小结

第三章 产品稳定性考察

3.1 稳定性考察试验方案

3.2 稳定性考察试验结果

3.3 本章小结

第四章 产品安全性研究

4.1 三致试验

4.2 急性经口毒性试验

4.3 30天喂养试验

4.4 本章小结

第五章 产品有效性研究

5.1 材料和方法

5.2 试食试验结果

5.3 本章小结

第六章 总结与展望

6.1 主要结论

6.2 工作展望

参考文献

致谢

攻读硕士学位期间发表的论文及专利