敌敌畏纳米乳剂与普通乳油的灭蟑效果及其抗性产生的对比研究

摘要

近年来化学杀虫剂广泛、不合理地使用导致昆虫的抗药性问题越来越突出。同时传统的杀虫剂型给人畜带来了巨大危害，也给环境带来了巨大的压力。因此开发新的绿色农药剂型已成为人们日益关注的问题。 水基型纳米乳剂具有对人畜低毒、易稀释、不易燃、不易爆、对环境污染小的特点，因此成为国内外农药剂型开发的重点。 本课题通过自行研究制备得到敌敌畏(DDVP)纳米乳剂，并将其作用于德国小蠊，观察其对德国小蠊的毒力及其抗性相关酶活性的影响，探讨DDVP纳米乳剂引起昆虫抗性产生的速度。同时与普通乳油进行对比，以期为病媒昆虫的防治提供一种新的高毒力、低抗性的杀虫剂剂型。并通过对德国小蠊抗性相关酶活性的研究，为采用抗性生化检测方法提供依据。 1.DDVP纳米乳剂的研制及其表征。首先优化筛选得到乳剂中表面活性剂、助乳化剂的比例。通过电磁加热搅拌器搅拌使乳液中各成分充分混合，加快DDVP纳米乳剂自发乳化的速度，最终研制得到DDVP纳米乳剂。该乳剂呈浅黄色、透明、均匀、不分层，理化性质稳定，-20±2℃和52±2℃下储藏14天，室温下放置2个月均未发生浑浊。乳油平均粒径为11.2±1.9nm，稀释10000倍后95％乳油粒径范围为76-103nm。该乳剂符合纳米乳剂的特性，可以用于对德国小蠊的毒力研究。 2.DDVP纳米乳剂与普通乳油的毒力对比。利用微量点滴法分别测定DDVP纳米乳剂、普通乳油对德国小蠊的半数致死量(LDso)，得到LD<,50>分别为0.0465μg/虫和O.2517μg/虫，对两种杀虫剂的LD<,50>进行t检验，得到t=3.5447(p<0.05)，可以认为DDVP纳米乳剂的毒力高于DDVP纳米乳油。 3. DDvP纳米乳剂、普通乳油的施药量和施药周期对德国小蠊抗性相关酶活性的影响。 3.1 DDVP纳米乳剂、普通乳油的施药量对德国小蠊抗性相关酶活性的影响。结果显示在低于DDVP乳油的浓度下，DDVP纳米乳剂对德国小蠊的乙酰胆碱酯酶(AchE)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)和1-NA酯酶的抑制作用比DDVP乳油要强。对酸性磷酸酯酶(ApE)开始产生抑制作用的浓度明显低于乳油组：本次研究中DDVP纳米乳剂抑制ApE的起始浓度为0.004％，而DDVP乳油均为0.01％。说明DDVP纳米乳剂可以提高德国小蠊靶标部位的敏感性，这有可能会减缓德国小蠊对DDVP纳米乳剂的抗药性产生。 3.2 DDVP纳米乳剂、普通乳油的施药周期对德国小蠊抗性相关酶活性的影响。在DDVP纳米乳剂作用下，随着施药时间的延长，AchE酶活性呈现波动性抑制趋势；GST、ApE和1-NA酯酶用药初期都发生了诱导激活，而后被抑制，但ApE和1-NA的抑制作用至施药后第18天尚未消失，而GST抑制后逐渐恢复到原水平。DDVP纳米乳剂对这四种酶的最大抑制作用分别出现在施药后第18、9、18、18天。DDVP乳油施药后AchE和GST酶活性先抑制而后有所恢复，ApE短暂抑制后，同1-NA酯酶一样出现酶活性升高。在0.0001％浓度时，DDVP乳油仅对AchE、GST和ApE三种酶产生了抑制，且最大抑制作用分别出现在施药后第3、5、1天。结果表明DDVP纳米乳剂对德国小蠊各种抗性相关酶活性的最大抑制作用出现较晚。多次低剂量接触DDVP乳油可使德国小蠊对其产生抗药性。本次研究中在DDVP纳米乳剂的作用下，AchE、ApE和1-NA酯酶虽未出现酶活性抑制后回升，但是由于GST的活性出现回升，提示德国小蠊对DDVP纳米乳剂有可能也会产生抗药性。 4. 德国小蠊对DDVP纳米乳剂、普通乳油的抗药性产生速度的对比研究。 DDVP纳米乳剂、普通乳油分别处理德国小蠊后，随着传代次数增加，德国小蠊对DDVP纳米乳剂的抗药性递增速度比普通乳油要慢。此外本课题初步建立了DDVP乳油作用德国小蠊后，ApE和1-NA酯酶活性与抗性系数的相关方程，为德国小蠊抗药性生化检测提供了依据。本次研究中由于德国小蠊对DDVP纳米乳剂尚未产生抗药性，因此尚不能建立DDVP纳米乳剂的抗性酶与抗性系数之间的相关方程。 本研究通过对比DDVP纳米乳剂和DDVP普通乳油的杀虫毒力，两者的施药量、施药周期对德国小蠊抗性相关酶活性的影响，以及德国小蠊对两种杀虫剂的抗性产生速度，初步证实I)DVP纳米乳剂具有比普通乳油更高的杀虫毒力，且德国小蠊对其抗药性的产生速度要比普通乳油慢，因此值得推广使用。同时本次研究初步建立了DDVP乳油作用于德国小蠊后，ApE和1-NA酯酶活性与抗性系数之间的相关方程，可为建立德国小蠊抗药性生化检测方法提供参考。

目录

文摘

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论文说明：主要缩写词表

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前言

第一章DDVP纳米乳剂的研制及纳米乳剂性能的试验研究

1.材料与方法

2.结果与分析

3.小结

参考文献

第二章DDVP纳米乳剂与普通乳油对德国小蠊的毒力比较

1.材料与方法

2.结果与分析

3.讨论

参考文献

第三章DDVP纳米乳剂、普通乳油的施药量对德国小蠊抗性相关酶活性影响的对比研究

1.材料与方法

2.结果与分析

3.讨论

参考文献

第四章DDVP纳米乳剂、普通乳油的施药周期对德国小蠊抗性相关酶活性影响的对比研究

1.材料与方法

2.结果与分析

3.讨论

参考文献

第五章德国小蠊对DDVP纳米乳剂、普通乳油的抗药性产生速度的对比研究及乳油抗性生化检测参考值

1.材料与方法

2.结果与分析

3.讨论

参考文献

结语

综述 农药纳米乳剂的形成及其特点

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致谢