分子标记技术在高山红景天性别鉴定中的应用研究

摘要

本试验以不同性别高山红景天植株叶片为材料，采用随机扩增多态性DNA(Random Amplified Po1ymorphism DNA，RAPD)技术和扩增片段长度多态性(Amplified Fragment Length Po1ymorphism，AFLP)技术，寻找与高山红景天性别连锁的分子标记。研究结果如下：
　　1．用改良的CTAB法能够提取浓度和纯度都较高的高山红景天基因组DNA，所得的DNA能取得较好的扩增效果，也能被彻底酶切，符合RADP和AFLP的技术要求。
　　2．通过RAPD分析，在245条随机引物中有40条引物可以扩增出3条以上清晰的条带，其他引物扩增带1～2条或者条带弥散。进一步重复试验表明，只有引物 OPK08在高山红景天雄株、两性株上扩增出约1200bp的特异性条带，这可能是一条与高山红景天性别紧密连锁的RAPD分子标记。
　　3．利用AFLP技术进行高山红景天性别鉴定的研究，应用64对引物组合EcoR I-NNN/Mse I-NNN对高山红景天雄株、雌株、两性植株基因池进行扩增，得到了带型清晰稳定的AFLP图谱，共扩增出18条差异条带，为进一步开展高山红景天AFLP分子标记工作提供了基础。

目录

声明

第一章 前言

1. 高山红景天概述

1.1 高山红景天的生物学特性

1.2 高山红景天研究进展

2. 植物性别研究

2.1植物的性别概述

2.2植物性别决定

2.3植物性别在农业生产的应用

2.4植物性别鉴定

3.分子标记研究

3.1 RAPD标记技术的原理及特点

3.2 AFLP标记技术的原理及特点

3.3 RFLP标记技术的原理及特点

3.4 SSR标记技术的原理及特点

3.5 SCAR 标记技术的原理及特点

3.6 分子标记技术在植物性别早期鉴定中的应用

4. 本研究的目的和意义

第二章 高山红景天性别的 RAPD标记研究

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.2 实验方法

2 结果与分析

2.1 DNA模板的制备

2.2 RAPD反应体系的优化

2.3 引物的筛选

2.4高山红景天性别相关 RAPD标记的选择

3 结论

第三章 高山红景天性别的 AFLP标记研究

1. 材料与方法

1.1 实验材料

1.2 实验方法

2 结果与分析

2.1 DNA模板的制备

2.2 DNA酶切与接头的连接

2.3 预扩增反应

2.4 选择性扩增反应

2.5 引物筛选及差异条带的获得

3 结论

第四章 讨论

1 高山红景天基因组 DNA的制备

2 RAPD分子标记技术

3 AFLP分子标记技术

参考文献

致谢