松材线虫病早期寄主薄壁细胞死亡方式的研究

摘要

该研究以一年生黑松(Pinus thunbergii)实生苗为实验材料,研究松材线虫病早期其寄主薄壁细胞的死亡过程和方式.按时间进程和与接种点上下距离的远近,对松苗分茎段进行粗分离和制作成石蜡切片,分别用番红-固绿双重染色法和碘化丙锭荧光染色法在光学显微镜下观察,以了解线虫侵染后在寄主体内的准确分布和数量的消长,寻找随着线虫的移动扩散,寄主不同部位细胞病变的数量、速度发生的变化规律,并进一步通过分析其细胞核的变化来判定松材线虫侵染后是否能诱发寄主细胞发生程序性死亡(programmedcell death,PCD).线虫接种后,立即从接种切口处暴露的树脂道侵入松苗木质部,横向沿木射线向髓部蔓延,纵向沿树脂道向深处扩散,形成网络状分布.接种初期线虫向下扩散的速度和数量都大于向上扩散;当松苗树脂道普遍破坏时,此时线虫向上向下扩散的速度一致明显加快,且树脂道、射线、形成层、皮层中包括髓部都发现了线虫的存在;当松苗外部症状出现之初,松苗多数组织细胞病变出现空洞,松材线虫此时已处于旺盛的增殖阶段,从根部也能分离出线虫.就松苗的细胞和组织病变的数量和速度而言,其与线虫的移动和扩散紧密相关.受害松苗薄壁组织和泌脂细胞在松材线虫到达侵害之前就已变性死亡.接种相同时间,距离接种点较远部位的薄壁细胞相对较近部位的病变程度轻、数量少.木质部轴向薄壁细胞发生病变死亡要比木射线细胞时间早且普遍.当多数树脂道普遍破损时,与接种点距离远近不同的部位细胞病变已无明显差异.相同接种时间内,与接种点上下距离相同的松苗茎段细胞病变的趋势与线虫上下移动快慢差异是一致的.侵染初期接种点上部的细胞病变与相应下部的细胞相比,程度较轻,数量较少;后期死亡程度大致相当.该研究首次使用PI荧光单染色法来检测松材线虫侵染能否引起植物细胞程序性死亡(PCD).观察到线虫侵染后寄主薄壁细胞凋亡(apoptosis)的部分典型形态特征,主要表现为细胞核着染后激发出红色荧光,凝缩变形,出现了可见的染色质浓缩,并在核膜下

目录

文摘

英文文摘

致谢

前言

上篇 文献综述

第一章松材线虫致病机理的研究进展

1松材线虫病的发生与流行

2松材线虫侵入寄主后的运动迁移与分布

3松材线虫病侵染引起寄主植物细胞学、组织学研究

4松材线虫病侵染引起寄主植物的生理生化响应

5松材线虫病的致病机理和抗病机理的研究

第二章植物PCD的研究进展

1高等植物细胞死亡及PCD的一般特征

2逆境下植物-环境互作发生的PCD及意义

3植物PCD的信号调控

下篇 研究内容

第三章松材线虫病组织病理学研究

1材料与方法：

2结果与分析

3结论与讨论

第四章松材线虫侵染引起寄主细胞死亡方式的研究

1材料与方法：

2结果与分析

3结论与讨论

第五章结论与展望

1结论

2讨论和展望

参考文献