AKF-PD对大鼠肾间质纤维化中TGF-β1、p-Smad2/3、Smad7作用的研究

摘要

研究背景：肾间质纤维化是所有慢性肾脏疾病进行性发展的共同通路，是导致终末期肾衰竭的主要病理基础，各种原发或继发性肾脏疾病均可发展成为肾间质纤维化，并进而出现肾功能衰竭。肾间质纤维化发生的机制非常复杂，涉及到细胞、细胞因子和细胞外基质等多种因素。其中，TGF-β在肾间质纤维化等多种器官组织的纤维化疾病中发挥了十分重要的作用，被公认为纤维化形成与发展的关键性因子，是治疗肾间质纤维化的重要靶标。TGF-β可以通过Smads、MAPK、cAMP／PICA等信号通路来诱导其下游因子的表达而产生致纤维化生物效应，其中以Smads通路最为重要，TGF-β／Smads信号通路在肾间质纤维化的发生发展过程中起重要作用。磷酸化Smad2／3(p-Smad2／3)是TGF-β／Smads信号通路中的重要信号转导分子，其蛋白表达量是TGF-β／Smads信号通路的激活程度的标志；Smad7是一种抑制性Smad蛋白，可以通过抑制Smad2／3的磷酸化而抑制TGF-β／Smads通路的信号转导。随着对肾间质纤维化发生机制的进一步认识，抗纤维化治疗越来越受到人们的重视。AKF-PD是本研究组合成得到的一种新的吡啶酮类化合物，在前期实验中，已证实它能明显抑制肾成纤维细胞等多种细胞的增殖，对单侧输尿管梗阻(UUO)肾间质纤维化模型具有良好的抗纤维化疗效，且其效果优于ACEI类药物依那普利。但AKF-PD抗肾间质纤维化的机制尚不清楚，因此，本实验拟在前期验的基础上，进一步探讨AKF-PD防治肾间质纤维化的作用机理。 目的：观察AKF-PD对UUO模型大鼠肾组织中TGF-β1、p-Smad2／3、Smad7等因子的影响，探讨AKF-PD防治肾间质纤维化的作用机制。 方法：将30只SD雌性大鼠随机分为假手术组、模型组和AKF-PD治疗组。对治疗组和模型组大鼠行单侧输尿管结扎术建立输尿管梗阻的动物模型。术后14天取3组大鼠的梗阻侧肾组织分别做HE和Masson染色，用免疫组化方法检测。TGF-β1、p-Smad2／3、 Smad7的蛋白水平表达及用RT-PCR方法。TGF-β1、Smad7的mRNA水平表达。 结果：AKF-PD可明显减轻胶原在肾间质中的沉积，改善肾组织病理变化，并下调肾组织中TGF-β1、p-Smad2／3的表达，上调Smad7的表达。 结论：AKF-PD可以通过影响UUO大鼠的肾组织中TGF-β／Smads信号通路中的TGF-β1、p-Smad2／3、Smad7而起到抑制纤维化的作用。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩略词表

原创性声明及关于学位论文使用授权说明书

第一章前言

第二章材料与方法

第三章实验结果

第四章讨论

第五章结论

参考文献

综述 TGF-β/Smads信号通路在肾间质纤维化中作用的研究进展

致谢

攻读学位期间主要的研究成果目录