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新生大鼠反复惊厥对脑内GABA受体α1和β2亚单位表达的短期和长期影响

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前言

第一章材料与方法

1.1实验材料

1.2实验方法与步骤

1.3统计学分析

第二章结果

2.1三氟乙醚诱导惊厥大鼠的行为特点

2.2免疫组织化学染色结果

2.3 Western blots结果

第三章讨论

第四章结论

参考文献

综述 发育期脑内GABAA受体表达和作用

致谢

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摘要

目的:研究新生期反复惊厥对大鼠脑内γ-氨基丁酸A受体(GABAAR)α1和β2亚单位表达的短期和长期影响。 方法:将96只生后(postnatal,PN-)7d的SD大鼠随机分成对照组和惊厥组,每组48只,惊厥组每日吸入三氟乙醚诱导惊厥发作1次,每次持续30min,连续6d;对照组同样操作但不吸入三氟乙醚。分别于完成诱导惊厥后(afterrecurrent seizures,ARS-)1d(PN-13d)、ARS-7d(PN-19d)及生后75d(PN-75d)处死大鼠取脑,采用免疫组织化学方法和Western blots方法观察大鼠大脑皮层及海马GABAAR α1和β2亚单位表达的变化。 结果: (1)免疫组化染色结果显示①在ARS-1d(PN-13d),惊厥组α1亚单位免疫化学累积光密度(accumulated optical density,AOD)在额叶、CA1区、CA2区与对照组比较均无显著性差异(P>0.05),在顶叶、海马齿状回(dentate gyrus,DG)、CA3区、CA4区均较对照组明显增高(P<0.05);在ARS-7d(PN-19d),惊厥组α1亚单位免疫化学AOD在额叶与对照组比较无显著性差异(P>0.05),在顶叶、DG、CA1-CA4区均较对照组明显增高(P<0.05);在PN-75d,惊厥组α1亚单位免疫化学AOD在额叶、DG、CA3区与对照组比较均无显著性差异(P>0.05),在顶叶、CA1区、CA2区、CA4区较对照组明显降低(P<0.05)。②在ARS-1d(PN-13d),惊厥组β2亚单位免疫化学AOD在丘脑、DG、CA1-CA4区与对照组比较均无显著性差异(P>0.05);在ARS-7d(PN-19d),惊厥组β2亚单位免疫化学AOD在额叶、顶叶、DG、CA3区与对照组比较均无显著性差异(P>0.05),在CA1区、CA2区、CA4区均较对照组明显增高(P<0.05),在丘脑较对照组明显降低(P<0.05);在PN-75d,惊厥组β2亚单位免疫化学AOD在额叶、顶叶、DG与对照组比较均无显著性差异(P>0.05),在丘脑、CA1-CA4区均较对照组明显降低(P<0.05)。 (2)Western blots结果显示①在ARS-1d及ARS-7d时,惊厥组α1亚单位蛋白表达在皮层以及海马与对照组比较均明显增多(P<0.05);在PN-75d,惊厥组α1亚单位蛋白表达在皮层与对照组比较无显著性差异(P>0.05),在海马与对照组比较明显减少(P<0.05)。②在ARS-1d,惊厥组β2亚单位蛋白表达在皮层以及海马与对照组比较均无显著性差异(P>0.05);在ARS-7d,惊厥组β2亚单位蛋白表达在皮层与对照组比较无显著性差异(P>0.05),在海马则较对照组明显增多(P<0.05);在PN-75d,惊厥组β2亚单位蛋白表达在在皮层与对照组比较无显著性差异(P>0.05),在海马与对照组比较明显减少(P<0.05)。 结论:新生期反复惊厥可使大鼠脑内GABAAR α1和β2亚单位表达在短期及长期产生不同的变化,这种改变可能参与到发育期惊厥性脑损伤过程中。

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