甘草次酸对表皮生长因子诱导的晶状体上皮细胞增殖信号转导机制的影响

摘要

目的:研究甘草次酸（GA）对体外培养的人晶状体上皮细胞生长的影响，以及对重组人表皮生长因子（rhEGF）诱导的人晶状体上皮细胞（LECs）内环磷酸腺苷（cAMP）、环磷酸鸟苷（cGMP）的影响及其机理。 方法:体外培养人晶状体上皮细胞株SR01/04，将培养的第3代细胞分为五组。A组为实验组：培养液+LECs+rhEGF+GA，根据GA不同浓度（7.5μmol/L，15μmol/L，30μmol/L），分为A1，A2，A3组；B组为增殖组：培养液+LECs+rhEGF；C组为对照组：培养液+LECs。取第3代LEC在96孔板中培养24小时后，在光镜下观察细胞形态学改变；用MTT测定法观察GA对LECs增殖的影响；用放射免疫分析法检测各组LECs内cAMP和cGMP含量，并进行比较。 结果: 1.各组LECs形态学观察（光镜）：（1）增殖组及对照组LEC细胞均增加，增殖组细胞数量较对照组多。（2）实验组细胞密度较增殖组明显降低，漂浮细胞较增殖组多。（3）A1与A2相比较，细胞密度及漂浮细胞数量无明显差别，A3组内细胞密度较A1及A2组明显降低，漂浮细胞数量较A1及A2组明显增加。 2.GA对LECs增殖的作用：（1）对照组、增殖组及药物组（A1，A2，A3）吸光值依次分别为，0.492±0.090，0.799±0.025，0.649±0.011，0.471±0.020，0.345±0.077。（2）各组间两两比较，除C组与A2组比较差异无显著性（P>0.05），其余各组间比较差异均有显著性（P<0.01）。（3）GA抑制LECs增殖，半数抑制量（24小时）为34.509μmol/L。 3.各组LECs内cAMP的浓度及比较：（1）增殖组LECs内cAMP浓度为1.079±0.191pmol/mL，对照组为1.783±0.150pmol/mL，两组比较有显著差异性的（P<0.01）；（2）不同浓度的GA组（7.5μmol/L，15μmol/L，30μmol/L）LECs内cAMP浓度依次为1.406±0.104pmol/mL，1.892±0.223pmol/mL，2.441±0.418pmol/mL，分别与增殖组进行两两比较，均有显著差异（P<0.01）；（3）不同浓度GA组LEC内cAMP浓度的组间两两比较，均有显著性差异（P<0.01）；（4）对照组分别与3个不同药物浓度组A1，A2，A3组LECs内cAMP浓度比较：C组分别与A1，A3组比较，有显著差异（P<0.01），与A2组比较，无显著差异（P>0.05）。 4.各组LECs内cGMP的浓度及比较：（1）增殖组LECs内cGMP浓度为0.175±0.021pmol/mL，对照组为0.118±0.016pmol/mL，两组比较是有显著差异性的（P<0.01）；（2）不同浓度的GA组（7.5μmol/L，15μmol/L，30μmol/L）LECs内cGMP浓度依次为0.136±0.006pmol/mL，0.107±0.005pmol/mL，0.078±0.007pmol/mL，分别与增殖组进行两两比较，均有显著差异（P<0.01）；（3）不同浓度GA组LECs内cGMP浓度的组间两两比较，均有显著性差异（P<0.01）。（4）对照组分别与3个不同药物浓度组A1，A2，A3组LECs内cGMP浓度比较：C组分别与A1，A3组比较，有显著差异（P<0.01），与A2组比较，无显著差异（P>0.05）。 结论: 1.rhEGF能促进LECs的增殖。 2.GA能升高LECs内cAMP浓度，降低LECs内cGMP浓度，由此可推测GA能通过细胞内cAMP和cGMP信号系统的相互作用抑制LEC增殖。 3.甘草次酸具有显著的抑制LECs增殖的作用，并呈浓度依赖性，提示其有可能成为防治后发障的有效药物。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩略词表

声明

第一章前言

第二章对象与方法

第三章结果

第四章讨论

第五章结论

参考文献

综述后发性白内障的发病机制和药物防治

致谢