文摘
英文文摘
基金项目
专业名词缩写中英文对照表
前言
第一章 hEF体系培养的hESCs向限定性内胚层的诱导分化技术路线
技术路线
1 材料和方法
1.1 材料与试剂
1.2 主要仪器
1.3 hESCs的培养与鉴定
1.4 hESCs的核型分析
1.5 端粒酶检测
1.6 hESCs向限定性内胚层诱导
1.7 hESCs来源的限定性内胚层分化潜能的检测
1.8 统计学处理
2 结果
2.1 hESCs的培养
2.2 hESCs的鉴定
2.3 hESCs自发分化潜能的检测
2.4 hESCs向限定性内胚层诱导
2.5 诱导5天获得的内胚层细胞的进一步分化能力的检测
3 讨论
4 结论
附图
第二章 hEF细胞支持限定性内胚层分化的机制研究
技术路线
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
1.2 主要仪器
1.3 hESCs的培养及向限定性内胚层诱导方法:
1.4 免疫荧光染色
1.5 PCR检测转录因子
1.6 蛋白质提取和Western检测
1.7 统计学处理
2 结果
2.1 H组、M组、FF组三种诱导体系下限定性内胚层的诱导效果
2.2 hEF细胞分泌可溶性因子促进hESCs向限定性内胚层分化
2.3 hEF细胞在hES培养基及RPMI1640处理后基因表达变化
2.4 Western检测Wnt下游β-catenin的表达
2.5 半定量PCR检测Wnt下游靶基因表达
2.6 Wnt3a和ActivinA不同诱导时间点Sox17和Brachyury染色结果
2.7 PCR检测原肠作用及三胚层发育相关基因表达变化
2.8 不同诱导体系下Sox17阳性率比较
3 讨论
4 结论
附图
第三章 孤雌与正常来源hESCs向胰岛样细胞诱导分化比较研究
技术路线
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
1.2 主要仪器
1.3 细胞培养
1.4 免疫组化
1.5 未分化hESCs流式计数SSEA4阳性细胞率
1.6 RNA的抽提
1.7 RT-PCR检测
1.8 relatime PCR检测标记基因的差异
1.9 胰岛素释放实验
2 结果
2.1 未分化hESCs流式计数结果
2.2 免疫染色结果
2.3 realtime PCR结果
2.4 Ki67表达结果
2.5 胰岛素分泌细胞检测结果
3 讨论
4 结论:
总结
参考文献
综述 内胚层发育信胰腺分化过程中关键信号通路的研究进展
致谢
在读博士期间发表的论文目录
个人简历