水飞蓟宾通过诱导自噬抑制腺样囊性癌肺转移的实验研究

摘要

目的：研究水飞蓟宾对腺样囊性癌实验性肺转移的抑制作用并探讨其机制。
　　方法：20只雌雄各半3～4周龄BALB/c nu/nu裸鼠随机分为实验组和对照组，每组10只。经尾静脉注射0.2ml细胞密度为1×106/ml的唾液腺腺样囊性癌肺高转移细胞(ACC-M)悬液。24h后，对照组裸鼠每天腹腔注射0.8ml RPMI-1640培养液，实验组裸鼠每天腹腔注射0.8ml经RPMI-1640稀释的水飞蓟宾溶液（浓度:1mg/ml）。6W后处死裸鼠，分别检测两组裸鼠的肺重量、肺肿瘤结节数目及大小。采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)、免疫印迹法(Western blot)和免疫组化(IHC)检测裸鼠肺部腺样囊性癌转移灶自噬相关基因LC3的表达，应用SPSS13.0统计软件对数据进行统计学分析，P＜0.05为差异具有统计学意义。
　　结果：对照组裸鼠肺重量为(4.20±0.06)g，实验组肺重量为（4.08±0.11）g;对照组裸鼠左、右肺肿瘤结节数为（9.29±5.91）个和（10.71±7.83）个，实验组裸鼠左、右肺肿瘤结节数为（3.11±3.76）个和（2.22±3.46）个;实验组裸鼠肺重量及左、右肺肿瘤结节数均显著低于对照组（P＜0.05），差异具有统计学意义。LC3 mRNA在实验组裸鼠腺样囊性癌肺转移灶组织中相对表达量为（0.784±0.103）显著高于对照组（0.685±0.077），差异有统计学意义（P＜0.05）。LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ蛋白在实验组裸鼠肺转移灶中的相对表达量（0.446±0.093;0.567±0.070），与对照组（0.276±0.096;0.418±0.098）相比，差异具有统计学意义(P＜0.05)。免疫组化实验结果发现，实验组裸鼠肺转移灶LC3阳性表达率(80％)显著高于对照组(30％)，差异有统计学意义（P＜0.05）。
　　结论：水飞蓟宾可以抑制唾液腺腺样囊性癌肺高转移细胞系在裸鼠体内的实验性肺转移，其机制可能是诱导肿瘤细胞发生自噬。