水稻高效受体系统的建立及两种遗传转化方法的研究

摘要

水稻是世界上重要的粮食作物,已成分为子生物学研究的模式作物之一.受体系统的建立和遗传转化已成为水稻分子生物学研究和基因工程的必须手段.由于水稻品种间遗传差异很大,且对植株再生和转化反应的基因型依赖性强,其再生和转化的复杂性和随机性很大.因此建立一种有效的、稳定的、再生系统和转化系统仍有许多问题需要细致深入的研究.该文在针对吉林省主栽的水稻品种进行了研究的过程中,优化了受体系统和遗传转化系统,并采用基因枪法和农杆菌介导法将Bt基因导入到优质的水稻品种中,获得了有价值的转基因植株.

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内容提要

前言

第一部分水稻高效遗传转化受体系统的建立

1.1实验材料与方法

1.1.1实验材料

1.1.2培养基

1.1.3实验方法

1.2结果与分析

1.2.1成熟胚愈伤组织的获得

1.2.2水稻愈伤组织的诱导

1.2.3愈伤组织的继代培养

1.2.4愈伤组织的分化

1.3讨论

1.3.1水稻遗传转化外植体的选择

1.3.2水稻成熟胚愈伤组织的诱导

1.3.4水稻愈伤组织的分化

第二部分基因枪法和农杆菌介导法的遗传转化

2.1材料和方法

2.1.1受体材料

2.1.2转化所用的质粒和菌种

2.1.3培养基

2.1.4仪器设备

2.1.5方法

2.2结果与分析

2.2.1水稻愈伤组织对Basta的敏感性测定

2.2.2基因枪法转化水稻的研究

2.2.3农杆菌介导的转化研究

2.3讨论

2.3.1基因枪法的遗传转化

2.3.2农杆菌介导法的遗传转化

2.3.3关于GUS组织化学染色

2.3.4在试验的过程中还存在一些不足之处

2.3.5展望

第三部分结论

3.1优化了吉林省主栽水稻品种(系)成熟胚的再生系统。

3.2愈伤组织对Basta进行敏感性测定

3.3用GUS基因（β-glucuronidase)的瞬间表达研究,优化PDS-1000型基因枪的转化参数。

3.4根据农杆菌侵染后愈伤组织的生长状态和褐化率优化了农杆菌介导法的遗传转化条件。

3.5获得了转Bt基因的转基因水稻植株

参考文献

图版说明

致谢