益美肤治疗SD大鼠急性β射线皮肤Ⅱ度损伤创面的实验研究

摘要

目的：通过比较创面大体变化、组织学变化及表皮干细胞标记物K19及整合素β1阳性细胞表达方面的变化，探讨益美肤对SD大鼠皮肤急性β射线Ⅱ度皮肤损伤创面的修复的效果。
　　方法：2-3月龄清洁级SD大鼠102只，体重190±10g，单笼喂养5天以适应环境。实验动物创面制备时使用SIMENS直线加速器，参数设置6MeV高能电子束，单次照射大鼠臀部裸露皮肤11分钟52秒，制作SD大鼠急性β射线Ⅱ度皮肤损伤创面。将实验大鼠随机分.为空白组、对照组和实验组。实验组创面外.用.益美肤，每日三次；对照组创面外用比亚芬，每日三次；空白组创面不予处理。
　　于放射后第1、3、5、7、14、21、35天，观察各组大鼠放射部位皮肤创面损伤及愈合情况后取放射部位皮肤组织，石蜡包埋切片后，一部分用于做HE染色用于组织病理学检查，另一部分做免疫组织化学检测（SP法）。使用Ipp6.0图像软件检测不同时相点创面表皮干细胞标记物K19和整合素β1阳性细胞表达情况。所有数据用SPSS18.0统计软件进行单因素方差分析，以p＜0.05为有统计学意义。
　　结果：1、大体观察：从照射后的第3天开始，空白组照射区皮肤出现干性脱屑等反应，甚至出现局部充血性红斑。对.照组及实验组在照射后第5天开始出现红斑反应，但无明显脱屑，红斑颜色较浅；随着时间推移，空白组创面颜色加深明显并形成苔藓样坏死溃疡痂皮，创面脱痂愈合延迟，愈合过程中逐步变厚变硬呈挛缩状态，表面不平整，色泽较正常皮肤深，充血水肿明显，毛发生长稀疏。对照组.实验组愈合过程类似，被覆新生上皮，愈合部位较平整，颜色与正常皮肤相仿，毛发生长相对较多。2、创面组织学观察：与空白组比较，对照组与实验组的毛细血管肿胀程度较轻，到14天后新生毛细血管逐步增多，上皮细胞增生较活跃，炎症反应较轻。3、免疫组化结果：K19及integrinβ1在空白组、对照组、实验组均有阳性表达，在基底细胞层及毛囊周围可见大量棕黄色颗粒，其中实验组阳性细胞数量最多。空.白.组.在.同.一.时.相.点.的.K19、β1整.合.素IOD.值.分.别与对照组、实.验.组.比较差异有统计学意义（p＜0.05），对照组与实验组比较差异无统计学意义（p＞0.05）。各组K19、integrinβ1的IOD值均在第21天达峰值，尤以实验组峰值最高，随后表达逐步降低。
　　结论：SD大鼠急性β射线Ⅱ度皮肤损伤创面外用益美肤后，表皮干细胞标记物integrinβ1及K19表达显著上调，增殖较活跃，加速创面上皮化进程，明显缩短创面愈合时间。益美肤对治疗大鼠急性β射线Ⅱ度皮肤损伤创面具有确切的疗效，疗效与比亚芬相当，具有临床使用和推广价值。

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第1章 引言

第2章材料和方法

2.1 实验材料

2.1.1 实验动物

2.1.2 主要仪器设备

2.1.3 实验试剂及实验药物

2.1.4 主要溶液配制

2.2 实验方法

2.2.1 实验动物选取及皮肤Ⅱ度急性β射线损伤模型的制备

2.2.2 实验动物分组

2.2.3 组织标本的采集与处理

2.2.4 观察指标

2.2.5 统计分析方法

第3章 实验结果

3.1 实验组

3.1.1 大体观察:

3.1.2 HE 染色:

3.1.3 免疫组化检测

3.2 对照组:

3.2.1 大体观察：

3.2.2 HE染色

3.2.3 免疫组化检测：

3.3 空白组

3.3.1 大体观察：

3.3.2 HE染色

3.3.3 免疫组织学变化

第4章 讨论

第5章 结论

第6章 应用

参考文献

综述：急性放射性皮肤损伤研究及治疗进展

攻读硕士研究生期间发表的论文

致谢