探讨丁酰环磷腺苷钙对CCl4诱导的大鼠肝纤维化的改善作用

摘要

目的：本研究旨在观察二丁酰环磷腺苷钙对肝纤维化大鼠肝组织病理学改变，及其对肝组织中MMP-1, TIMP-1表达的影响，研究二丁酰环磷腺苷钙对肝纤维化的改善作用，探讨其可能的作用机理，为纤维化提供新的防治途径。
　　方法：随机将42只大鼠分为对照组、模型组、治疗组3组。适应性饲养1周，从实验第1天开始予以模型组及治疗组腹腔注射40%CCl4橄榄油混合溶液1ml/kg,此后每3天注射2ml/kg。对照组同剂量生理盐水腹腔注射。在造模的第6、7周末随机从各组中选取1只大鼠，予以乙醚深度麻醉后处死，并取肝脏组织行肝组织病理检测，结果提示肝脏组织纤维化形成，造模成功。第8周初开始予治疗组二丁酰环磷腺苷钙40mg/(kg·d)溶于3ml生理盐水灌胃,模型组和对照组同剂量生理盐水灌胃。造模过程中对照组、模型组、治疗组死亡大鼠为1、3、2只。于实验12周结束后，各组均随机取8只大鼠禁食12h，再予以乙醚深度麻醉，断头处死，采集肝脏组织标本，采用HE染色观察肝脏组织炎症浸润情况；Masson染色观察大鼠肝脏组织肝纤维化程度；免疫组化染色及Western blotting检测各组肝组织中基质金属蛋白酶MMP-1和其抑制因子TIMP-1的表达。
　　结果：
　　1、肝脏组织HE染色下的炎症活动度计分结果：模型组比正常组显著增高(P<0.01)。两者之间存在明显统计学差异。模型组比治疗组显著增高（P<0.01）。
　　2、肝脏组织Masson染色下的肝组织纤维化程度计分结果:模型组比正常组显著增高(P<0.01)。两者之间存在明显统计学差异。模型组比治疗组显著增（P<0.01）。
　　3、肝组织免疫组织化学染色结果：MMP-1表达水平免疫组织化学评分：模型组比对照组显著降低（P<0.01）。治疗组对比模型组显著升高（P<0.01）。TIMP-1表达水平免疫组织化学评分：对照组显著低于于模型组（P<0.01）。治疗组显著低于模型组（P<0.01）。
　　4、Western blotting结果显示：MMP-1相对表达水平：对照组显著高于模型组（P<0.01）。治疗组显著高于模型组（P<0.01）。TIMP-1相对表达水平：对照组显著低于模型组（P<0.01）。治疗组显著低于于模型组（P<0.01）。
　　结论：
　　二丁酰环磷腺苷钙可减轻CCL4诱导的大鼠肝纤维化程度，其作用机制可能与其上调MMP-1和下调TIMP-1蛋白表达有关。

目录

声明

主要英文缩略语索引

第 1 章 绪 论

第 2 章 材料与方法

2.1 实验材料

2.2 方法

2.3 统计学分析

第 3章 实 验 结 果

3.1 大鼠肝脏HE染色结果及评分

3.2 大鼠肝脏Masson结果及评分

3.3 MMP-1、TIMP-1在不同组别肝脏组织中的表达的免疫组化染色结果

3.5 Western blotting 检测 MMP-1、TIMP-1 在不同组别肝组织中的表达水平

第4章 讨论

4.1肝纤维化动物模型的构建

4.2肝纤维化的发生机制与二丁酰环磷酰钙对肝纤维化的作用

4.3 不足之处

第5章 结论

参考文献

综述:肝纤维化的无创性检测探究

硕士研究生期间发表的文章

致谢