60Co-γ射线对人参愈伤组织的辐射效应研究

摘要

人参（Panax ginseng C.A.Mey）;为五加科人参属多年生药用草本植物;是补气固脱之要药;被广泛应用于预防和治疗各种疾病。但由于人参虽然种植分布广、面积大;但相对品种较少;且生长年限长对环境要求严格。因此丰富育种途径、创造更多的种质资源成为近年来人参育种研究热点。 本文利用19.38 Gy、35.98 Gy、60.9 Gy、83.04 Gy、112.1 Gy 60Co-γ射线照射人参愈伤组织对其进行诱变处理;通过考察辐照对人参愈伤组织形态指标、生理特性、细胞学、遗传稳定性以及皂苷含量的影响;筛选出半致死剂量;确定辐射对人参愈伤组织产生的诱变效应;主要研究结果如下： 1.人参愈伤组织经 60Co-γ射线照射后;随着辐射剂量的增加、恢复培养时间的延长;愈伤组织生长受抑制程度逐渐明显;褐化率升高;水分损失严重;增殖速率减缓。并通过线性分析确定辐射人参愈伤组织半致死剂量为40 Gy; 2. 人参愈伤组织经 60Co-γ射线照射后;MDA含量随辐射剂量增加而升高;随恢复培养时间延长而降低;SOD活力随辐射剂量增加而升高;随恢复培养时间延长先升高后降低;CAT活力、POD活力随辐射剂量先上升再下降随即继续上升;CAT活力随恢复培养时间延长总体呈上升趋势;POD活力随恢复培养时间延长呈先下降后上升趋势;可溶性蛋白浓度随辐射剂量增大、恢复培养时间延长均呈先上升后下降趋势;可溶性糖含量随辐射剂量呈先上升后下降趋势;随恢复培养时间延长呈先下降后上升趋势; 3. 人参愈伤组织经 60Co-γ 射线照射后;随着辐射剂量的增加;细胞核仁染色变浅;细胞质固缩;细胞核逐步降解;细胞器破碎;质壁分离情况严重;染色体数目发生突变;出现非整倍体;线粒体数量减少并向细胞膜处分散;结构膨胀; 4. 人参愈伤组织经 60Co-γ射线照射后;利用18条人参SSR核心引物对对照组及辐射处理诱变组进行条带扩增;其中引物P35、gm129扩增出特异性条带;与对照组相比出现条带缺失现象; 5. 人参愈伤组织经 60Co-γ射线照射后;通过HPLC-MS/MS法测得人参皂苷M-Rb1、M-Rc/Rb2/Rb3、M-Rd在35.98 Gy剂量处理下;皂苷M-Re、Rb1、Re、Rf、Rg2在83.04 Gy剂量处理下;皂苷Rc、M-Rd在19.38 Gy剂量处理下;含量均大幅度高于对照组。

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