Pirh2、p53在不同转移潜能乳腺癌细胞系中的表达及意义

摘要

Pirh2是最近发现的泛素连接酶E3家族的新成员，具有内在“泛素化”活性的RING-H2结构域;p53是迄今发现与人类恶性肿瘤相关性最高的一种抑癌基因。已有研究表明，Pirh2能够促进p53泛素化，导致其降解，从而参与癌症进展。而癌症的发展、转移过程与癌细胞的侵袭转移能力密切相关。
　　目的:
　　本实验旨在探讨Pirh2、p53在不同转移潜能乳腺癌细胞系中的表达及意义，并以正常乳腺上皮细胞系作为对照，以期证明Pirh2、p53与乳腺癌细胞侵袭转移能力的相关性，为乳腺癌的诊治过程寻找新的分子机制及治疗靶点提供初步理论依据。
　　方法:
　　传代培养正常乳腺上皮细胞系MCF-10A、低转移潜能乳腺癌细胞系MCF-7、中转移潜能乳腺癌细胞系MDA-MB-231、高转移潜能乳腺癌细胞系MDA-MB-435s;应用实时荧光定量PCR(qPCR)及蛋白质免疫印迹法(Western blot)方法分别检测Pirh2、p53mRNA及蛋白在正常乳腺上皮细胞系及不同转移潜能的乳腺癌细胞系中的表达情况。
　　结果:
　　1.Pirh2、p53在正常乳腺上皮细胞系MCF-10A及低转移潜能乳腺癌细胞系MCF-7、中转移潜能乳腺癌细胞系MDA-MB-231、高转移潜能乳腺癌细胞系MDA-MB-435s中均有表达。
　　2.Pirh2在乳腺癌细胞系中的表达高于正常乳腺上皮细胞系，差异有统计学意义(P＜0.05)，p53在乳腺癌细胞系中的表达低于正常乳腺上皮细胞系，差异有统计学意义(P＜0.05)。
　　3.随着乳腺癌细胞转移潜能的升高，Pirh2的表达水平呈上升趋势，组间两两比较，差异有统计学意义(P＜0.05); p53的表达水平呈下降趋势，组间两两比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。
　　4.Pirh2、p53二者的表达水平变化呈显著负相关(rmRNA=-0.904，PmRNA＜0.01; r蛋白=-0.953，P蛋白＜0.01)。
　　结论:
　　1.Pirh2、p53的表达与乳腺癌细胞侵袭转移能力相关，Pirh2在乳腺癌细胞系中高表达，p53在乳腺癌细胞系中低表达，并且随着乳腺癌细胞转移潜能的增高，Pirh2表达水平上调、p53表达水平下降。
　　2.Pirh2、p53的表达变化水平呈显著负相关，提示在乳腺癌细胞中可能存在Pirh2/p53信号通路，并且Pirh2负性调控p53。

目录

摘要

前言

1．实验材料与方法

1．1 实验材料

1．2 实验方法

2．结果

2．1 细胞培养结果(细胞光学图片×1∞)

2．2 qPCR检测结果的准确性分析

2．3 qPCR检测Pirh2、p53 mRNA的表达结果分析

2．4 Western blot检测Pirh2、p53蛋白的表达结果分析

2．5 Pirh2、p53表达变化水平的相关性分析

3．讨论

4．结论

结语

参考文献

综述

附录一：英文缩略词表

附录2：攻读硕士学位期间发表的学术论文

致谢

声明